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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 细胞转染求助！SOS
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)

[求助] 细胞转染求助！SOS

最近做细胞转染，24孔板时转染siRNA 24h后提RNA，RT-qPCR检测抑制效率在80%左右，但是换成6孔板铺板转染，相同条件（试剂比例进行同比例放大）下检测抑制效率时只有50%，大打折扣，也重复了几次还是这样。不知道大家是否遇到类似的情况呢？
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坚持到底就是胜利！
1楼 2016-09-30 09:01:18
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ysk1989

新虫 (小有名气)
我也遇到过这种情况，我换了一下转染试剂，结果还是很满意的，是英格恩生物的RNA转染试剂，专门针对siRNA转染，纳米聚合物材料，转染效率高，细胞毒性低，你可以试一下。
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2楼2016-10-08 14:05:12
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ysk1989 at 2016-10-08 14:05:12
我也遇到过这种情况，我换了一下转染试剂，结果还是很满意的，是英格恩生物的RNA转染试剂，专门针对siRNA转染，纳米聚合物材料，转染效率高，细胞毒性低，你可以试一下。

嗯嗯，谢谢哈，不过后来根据提取的RNA浓度我更倾向与认为是细胞生长速度导致了转染效率差，后面要在实验验证下是不是这个原因，还是谢谢你。
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坚持到底就是胜利！
3楼2016-10-08 14:20:42
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匿名

用户注销 (著名写手)
本帖仅楼主可见
4楼2016-10-08 22:49:37
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Flieish411

新虫 (初入文坛)
您好我想问一个很简单的问题。转染24h，是需要很准确的24h吗，还是说在24h左右就可以？作为一个跟着师姐做实验的本科生，因为实验室条件有限，不小心错过了提RNA的时间［大概比以前的晚了4小时左右］，现在凑合提了但是好忐忑

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5楼2017-05-22 16:49:05
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by Flieish411 at 2017-05-22 16:49:05
您好我想问一个很简单的问题。转染24h，是需要很准确的24h吗，还是说在24h左右就可以？作为一个跟着师姐做实验的本科生，因为实验室条件有限，不小心错过了提RNA的时间［大概比以前的晚了4小时左右］，现在凑合提了 ...

一般情况影响不大，自己做好实验记录。

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坚持到底就是胜利！
6楼2017-05-22 17:41:37
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muyangnan

新虫 (初入文坛)
请问是肿瘤细胞吗

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7楼2017-05-22 20:03:04
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yeyuemei

新虫 (初入文坛)
楼主您好，同做转染，请问24孔板用什么试剂盒提取RNA呀？我能查到的一般试剂盒都需要20-50万细胞
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8楼2023-05-23 20:58:11
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by yeyuemei at 2023-05-23 20:58:11
楼主您好，同做转染，请问24孔板用什么试剂盒提取RNA呀？我能查到的一般试剂盒都需要20-50万细胞

传统的方法即可，Trizol裂解，酚氯仿抽提，加上糖原沉淀。
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坚持到底就是胜利！
9楼2023-05-25 17:13:47
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