24小时热门版块排行榜    

查看: 1499  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

w11028716

捐助贵宾 (小有名气)

[求助] HPLC求助 已有4人参与

有没有HPLC大神在,求助一个HPLC基线漂移的问题。
搜过很多问题解决都没有合适的办法。
先上图
HPLC求助
这个是C18柱, 流动相是Phosphate, 洗脱的solvent是Methanol
第一次跑的时候,没有洗脱梯度的时候基线是平的,这个图是第二次跑的时候出现的,后面一直有这个问题。
我试过换新的柱子,换新的methanol,把methanol换成acetonitrile。 都一直有这个问题。整个色谱仪都用hexane 和 iso propanol 洗了超过4 个小时。依旧有这个问题。 压力值也是稳定的,有没有大神能解答一下。。。急需。。。
HPLC求助-1
这个图是把柱子拿走以后40%的ACN+60% 纯水跑的,基线一直在上升。中间那个压力值是我暂停流动以后造成的,请忽略。

悬赏50金币。。。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

w11028716

捐助贵宾 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zinfly at 2016-09-27 09:43:06
没用Hex洗柱子吧?短时间,低浓度可以,太久太高容易把柱子洗废了。
流动相,洗脱程序是自己摸索的,还是参考文献?
刚才看了下鸟嘌呤核苷用C18洗脱的时候常用,Ma-H2O, 添加磷酸或者其他改性。而且水的比例不低 ...

这个图没有跑任何样品,就是个blank,这个就很奇葩了. column换了好几个,blank都是这个样子的

发自小木虫IOS客户端
8楼2016-09-27 15:06:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

Kobe君临天下

铁杆木虫 (著名写手)

2楼2016-09-27 08:04:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MorsThanatos

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
找工程师处理吧,这种问题基本的处理过还有问题,一般自己就搞不定了,直接找工程师节省时间
3楼2016-09-27 08:30:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zinfly

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没用Hex洗柱子吧?短时间,低浓度可以,太久太高容易把柱子洗废了。
流动相,洗脱程序是自己摸索的,还是参考文献?
刚才看了下鸟嘌呤核苷用C18洗脱的时候常用,Ma-H2O, 添加磷酸或者其他改性。而且水的比例不低。
看你的图,感觉拖尾太严重,改变一下流动相试试吧,个人感觉,你用Ma,ACN,Iso-pro,Hex这些都是不一定适合你的样品,极性偏小。
推荐一个论文:夏秋采收荆半夏中鸟嘌呤核苷和次黄嘌呤核苷的含量比较

不知道你样品浓度多少,感觉你这个像是进样针污染,样品浓度大,而且流动相洗脱能力弱。(Hex,Iso相对其他洗脱能力属于很强的,但是不一定适合你的样品),
建议,更换洗针液,(甲醇-水等比例),装上柱子甲醇水等比例冲洗柱子
4楼2016-09-27 09:43:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见