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HPLC求助 已有4人参与
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有没有HPLC大神在，求助一个HPLC基线漂移的问题。 搜过很多问题解决都没有合适的办法。 先上图  这个是C18柱， 流动相是Phosphate， 洗脱的solvent是Methanol 第一次跑的时候，没有洗脱梯度的时候基线是平的，这个图是第二次跑的时候出现的，后面一直有这个问题。 我试过换新的柱子，换新的methanol，把methanol换成acetonitrile。 都一直有这个问题。整个色谱仪都用hexane 和 iso propanol 洗了超过4 个小时。依旧有这个问题。 压力值也是稳定的，有没有大神能解答一下。。。急需。。。  这个图是把柱子拿走以后40%的ACN+60% 纯水跑的，基线一直在上升。中间那个压力值是我暂停流动以后造成的，请忽略。 悬赏50金币。。。 |
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MorsThanatos
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3楼2016-09-27 08:30:53
Kobe君临天下
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2楼2016-09-27 08:04:15
zinfly
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【答案】应助回帖
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没用Hex洗柱子吧？短时间，低浓度可以，太久太高容易把柱子洗废了。 流动相，洗脱程序是自己摸索的，还是参考文献？ 刚才看了下鸟嘌呤核苷用C18洗脱的时候常用，Ma-H2O， 添加磷酸或者其他改性。而且水的比例不低。 看你的图，感觉拖尾太严重，改变一下流动相试试吧，个人感觉，你用Ma，ACN，Iso-pro，Hex这些都是不一定适合你的样品，极性偏小。 推荐一个论文：夏秋采收荆半夏中鸟嘌呤核苷和次黄嘌呤核苷的含量比较 不知道你样品浓度多少，感觉你这个像是进样针污染，样品浓度大，而且流动相洗脱能力弱。（Hex，Iso相对其他洗脱能力属于很强的，但是不一定适合你的样品）， 建议，更换洗针液，（甲醇-水等比例），装上柱子甲醇水等比例冲洗柱子 |
4楼2016-09-27 09:43:06
w911227
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5楼2016-09-27 10:50:22