24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 661  |  回复: 2
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

冷落清秋雨

新虫 (初入文坛)

[求助] BAC筛选难题 已有1人参与

用PCR的方法筛选BAC文库的时候,已经用引物扩增出384菌板的混池条带,也就是384菌板是有我们所要的基因的,并且测序结果也证明序列就是目的基因;但是,进一步将每行混在一起摇菌再跑PCR的时候就没有条带了,这是哪里出了问题?我做了好几次了,都是这样,是不是不稳定?有谁遇到过吗?急求

@天使托 发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mayunhui

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

如果确定目的基因在板池里面,干嘛不直接用384孔板进行菌落PCR呢,不需要再构建行池或列池了。
书到用时方恨少
3楼2016-10-20 10:02:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 3 个回答

BAC 文库

新虫 (初入文坛)

384板混合池能够筛选到基因,说明阳性克隆在整个384孔板中。1)构建行列混合池时,是每个混合池都没有阳性条带吗?2)每一行混在一起摇菌?这种做法有问题,会造成部分菌株的丢失。3)是采用菌液PCR吗?
2楼2016-10-14 09:02:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 343求调剂 +4 爱羁绊 2026-03-28 4/200 2026-03-28 17:44 by wxiongid
[考研] 本科双非材料,跨考一志愿华电085801电气,283求调剂,任何专业都可以 +5 芝士雪baoo 2026-03-28 6/300 2026-03-28 15:25 by 1018329917
[考研] 346求调剂 一志愿070303有机化学 +3 萝卜炖青菜 2026-03-28 3/150 2026-03-28 14:11 by 唐沐儿
[考研] 0703化学求调剂 +9 奶油草莓. 2026-03-22 10/500 2026-03-28 13:30 by 唐沐儿
[考研] 321求调剂 +6 材料cailiao 2026-03-21 6/300 2026-03-28 13:14 by 唐沐儿
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +8 邱gl 2026-03-27 8/400 2026-03-28 12:42 by 唐沐儿
[考研] 0856,材料与化工321分求调剂 +12 大馋小子 2026-03-27 13/650 2026-03-28 10:56 by self2008
[考研] 材料求调剂一志愿哈工大324 +7 闫旭东 2026-03-28 9/450 2026-03-28 08:51 by Xu de nuo
[考研] 考研调剂 +4 Sanmu-124 2026-03-26 4/200 2026-03-27 17:49 by kiokin
[考研] 272求调剂 +7 脚滑的守法公民 2026-03-27 7/350 2026-03-27 17:23 by laoshidan
[考研] 材料学硕,求调剂 6+5 糖葫芦888ll 2026-03-22 10/500 2026-03-27 08:18 by hypershenger
[考研] 342求调剂 +3 加油a李zs 2026-03-26 3/150 2026-03-27 00:29 by wxiongid
[考研] 325求调剂 +3 Aoyijiang 2026-03-23 3/150 2026-03-26 20:46 by 不吃魚的貓
[考研] 303求调剂 +6 蓝山月 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:47 by 418490947
[考研] 生物技术与工程 +3 1294608413 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:02 by 1294608413
[考研] 282求调剂 +3 wcq131415 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:16 by userper
[考研] 求调剂一志愿武汉理工大学材料工程(085601) +5 WW.' 2026-03-23 7/350 2026-03-24 14:50 by sprinining
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
信息提示
请填处理意见