应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » BAC筛选难题
汕头大学海洋科学接受调剂
31/1返回列表
查看: 666  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

冷落清秋雨

新虫 (初入文坛)

[求助] BAC筛选难题 已有1人参与

用PCR的方法筛选BAC文库的时候，已经用引物扩增出384菌板的混池条带，也就是384菌板是有我们所要的基因的，并且测序结果也证明序列就是目的基因；但是，进一步将每行混在一起摇菌再跑PCR的时候就没有条带了，这是哪里出了问题？我做了好几次了，都是这样，是不是不稳定？有谁遇到过吗？急求

@天使托 发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-09-26 10:27:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

BAC 文库

新虫 (初入文坛)
384板混合池能够筛选到基因，说明阳性克隆在整个384孔板中。1）构建行列混合池时，是每个混合池都没有阳性条带吗？2）每一行混在一起摇菌？这种做法有问题，会造成部分菌株的丢失。3）是采用菌液PCR吗？
赞一下 回复此楼
2楼2016-10-14 09:02:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mayunhui

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

如果确定目的基因在板池里面，干嘛不直接用384孔板进行菌落PCR呢，不需要再构建行池或列池了。
赞一下(1人) 回复此楼
书到用时方恨少
3楼2016-10-20 10:02:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 冷落清秋雨 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +7 小聂爱学习 2026-04-11 10/500 2026-04-14 01:37 by wulijun2012
[考研] 一志愿中南大学 0855 机械 286 求调剂 +11 不会吃肉 2026-04-12 11/550 2026-04-13 21:59 by bljnqdcc
[考研] 求调剂 +14 雪逢冬 2026-04-10 14/700 2026-04-13 21:38 by gretl
[考研] 化学070300 求调剂 +21 哈哈哈^_^ 2026-04-12 21/1050 2026-04-13 21:36 by nxybio2007
[考研] 调剂求收留 +31 果然有我 2026-04-10 32/1600 2026-04-13 21:35 by gretl
[教师之家] 转长聘了 +3 简单化xn 2026-04-13 3/150 2026-04-13 14:18 by wwwkkk83
[考研] 335求调剂 +18 想上岸呀！！ 2026-04-12 19/950 2026-04-13 14:15 by 张zhihao
[考研] 电气专硕320求调剂 +6 小麻子111 2026-04-10 6/300 2026-04-12 10:54 by lemon6009
[考研] 0854调剂 +12 长弓傲 2026-04-09 13/650 2026-04-12 09:56 by 逆水乘风
[考研] 一志愿西北工业大学289 085602 +33 yang婷 2026-04-10 34/1700 2026-04-12 08:11 by Art1977
[考研] 化工调剂求导师收留！一志愿失利，踏实肯干，有植物提取科研经历 +20 yzyzx 2026-04-09 21/1050 2026-04-12 00:12 by 小小小小啦啦啦
[考研] 调剂 +5 文道星台 2026-04-11 5/250 2026-04-11 15:01 by 凯凯要变帅
[考研] 087100初试311求调剂 +4 任雅琴 2026-04-09 4/200 2026-04-11 10:33 by zhq0425
[考研] 337求调剂 +4 研s. 2026-04-10 4/200 2026-04-11 08:57 by zhq0425
[考研] 085506-求调剂-285分 +3 雷欧飞踢 2026-04-08 3/150 2026-04-11 08:37 by zhq0425
[考研] 生物学308求调剂（一志愿华东师大） +6 相信必会光芒万� 2026-04-10 6/300 2026-04-11 05:23 by zhuwenxu
[考研] 吉大计算机技术331分，英语六级，求调剂 +3 峰峰021116 2026-04-09 3/150 2026-04-10 20:01 by chemisry
[考研] 085400电子信息类（川大控制工程）求调剂可跨专业 求老师联系 +3 626776879 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:05 by 猪会飞
[考研] 331求调剂 +5 luoxin0706. 2026-04-08 5/250 2026-04-08 22:15 by zhouyuwinner
[考研] 22408 266求调剂 +11 masss11222 2026-04-07 14/700 2026-04-08 11:06 by yulian1987
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭