应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr扩增的跑出来的点泳条带长度与目的基因不符合？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
41/1返回列表
查看: 1274  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

huihey

新虫 (初入文坛)

[求助] pcr扩增的跑出来的点泳条带长度与目的基因不符合？ 已有2人参与

如图片，应该是815左右，现在的才250多，为什么呢？引物用的IRX3R2和F2，做了一个温度梯度的58度到61度。体系如下图，什么原因？

pcr扩增的跑出来的点泳条带长度与目的基因不符合？


pcr扩增的跑出来的点泳条带长度与目的基因不符合？-1


发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-09-25 19:27:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huihey

新虫 (初入文坛)
引物长度应该没什么问题

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
2楼2016-09-25 20:22:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
确定PCR程序没有问题的的话，推测可能是模板的原因。
赞一下 回复此楼
3楼2016-09-26 11:21:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

llsllslls92

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PCR做不出来的很大问题在于引物的设计，引物设计的好，前提是模板要正常，一般都能扩增出条带来，基本与温度没什么大关系，现在，我建议你检查下模板的质量，你是用的cDNA 所以RNA的提取质量一定要过关，还有这个基因是组成型表达的还是诱导表达的，需要先了解下在选择合适的组织进行提取，做PCR时， 可以先做个大的温度跨度进行PCR，50度一个，55度一个 60度一个 ，延伸1分钟，制备质量好点的1%的胶进行电泳，起码把Marker 跑清楚漂亮点。
赞一下 回复此楼
4楼2016-09-26 13:50:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 huihey 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 298分 070300求调剂 +10 zwen03 2026-04-02 10/500 2026-04-03 09:05 by 羊儿丹
[考研] 279求调剂 +5 qazplm0852 2026-04-02 5/250 2026-04-02 22:38 by liveagain126
[考研] 一志愿山东大学，085600，344 +7 魏子per 2026-04-02 8/400 2026-04-02 21:12 by 百灵童888
[基金申请] esi高被引论文是不是能对中标有所加分和帮助呢 +4 redcom 2026-04-01 5/250 2026-04-02 20:48 by redcom
[考研] 266分，一志愿电气工程，本科材料，求材料专业调剂 +7 哇呼哼呼哼 2026-04-02 7/350 2026-04-02 20:13 by yulian1987
[考研] 一志愿北京科技大学085601材料工程英一数二初试总分335求调剂 +8 双马尾痞老板2 2026-04-02 9/450 2026-04-02 14:45 by 5896
[考研] 学硕化学工程与技术，一志愿中国海洋大学320+求调剂 +8 披星河 2026-04-02 8/400 2026-04-02 14:12 by oooqiao
[考研] 265求调剂11408 +4 刘小鹿lu 2026-03-27 4/200 2026-04-02 11:27 by guyan1000
[考研] 0805求调剂 +8 是水分 2026-03-31 8/400 2026-04-02 10:46 by guanxin1001
[考研] 建环，能源，土木老师路过看一看！！！ +4 嘿嘿uu 2026-04-01 4/200 2026-04-01 20:42 by 无懈可击111
[考研] 070300一志愿211，312分求调剂院校 +14 小黄鸭宝 2026-03-30 14/700 2026-04-01 20:19 by 赖春艳
[考研] 285求调剂 +5 FZAC123 2026-03-30 5/250 2026-04-01 15:50 by 韩雨涵
[考研] 一志愿 南京航空航天大学 ，080500材料科学与工程学硕 +7 @taotao 2026-03-30 7/350 2026-04-01 14:30 by chenqifeng666
[考研] 333求调剂 +4 阿科逸 2026-03-31 4/200 2026-04-01 09:11 by jp9609
[考研] 315求调剂 +6 akie... 2026-03-28 7/350 2026-03-31 16:48 by asdfzly
[考研] 求调剂 +8 11ggg 2026-03-30 8/400 2026-03-31 13:56 by nanaliuyun
[考研] 调剂 +4 GK72 2026-03-30 4/200 2026-03-30 20:32 by dick_runner
[考研] 328求调剂 +8 嗯滴的基本都 2026-03-27 8/400 2026-03-30 17:20 by Wang200018
[考研] 343求调剂 +6 爱羁绊 2026-03-29 6/300 2026-03-29 12:00 by 无际的草原
[考研] 11408软件工程求调剂 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 21:50 by zhq0425
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭