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明胶酶谱检测法
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nvwangzzh
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明胶酶谱检测法
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麻烦问一下,有谁做过明胶酶谱检测,由于要做明胶酶谱检测,我一点也没有接触过,求指点如何确定抓的条带是MMP9还是MMP2
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1楼
2016-09-24 14:40:50
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2楼
:
Originally posted by
kaobo2012
at 2016-09-24 23:31:12
是跑native page,然后跟底物反应那种吗?我没有做过这个酶,但是我做过其他酶的酶谱实验。基本思路都差不多。都是根据酶的分子量来判断的。
谢谢,还有疑问,没有mark么?没有什么对照么?最近导师让我查这个方法,做预实验,有许多地方不懂请谅解。添麻烦了(我经常做蛋白免疫印迹,通过蛋白质分子质量与mark对照就能来确定蛋白质的大体位置,从而判断所出的条带是否是我想要的)
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3楼
2016-09-25 18:40:00
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2016-09-26 22:51:54
是跑native page,然后跟底物反应那种吗?我没有做过这个酶,但是我做过其他酶的酶谱实验。基本思路都差不多。都是根据酶的分子量来判断的。
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nvwangzzh
2楼
2016-09-24 23:31:12
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3楼
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nvwangzzh
at 2016-09-25 18:40:00
谢谢,还有疑问,没有mark么?没有什么对照么?最近导师让我查这个方法,做预实验,有许多地方不懂请谅解。添麻烦了(我经常做蛋白免疫印迹,通过蛋白质分子质量与mark对照就能来确定蛋白质的大体位置,从而判断所 ...
native page,用Marker,参考意义不是很大。因为蛋白是靠自身的电荷移动,另外也有许多多聚体。你可以做阳性对照。就是纯化好的某个酶,单独上一个泳道,这样比较简单,当然,如果你实验室条件允许,也可以把相应的条带切下来,打质谱,也很有说服力。
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4楼
2016-09-25 20:50:47
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3楼
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nvwangzzh
at 2016-09-25 18:40:00
谢谢,还有疑问,没有mark么?没有什么对照么?最近导师让我查这个方法,做预实验,有许多地方不懂请谅解。添麻烦了(我经常做蛋白免疫印迹,通过蛋白质分子质量与mark对照就能来确定蛋白质的大体位置,从而判断所 ...
native page,我还没有做过WB,不知道结果是什么样子的。
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5楼
2016-09-25 20:55:10
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