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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 蛋白纯化
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风之翼HWX

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白纯化 已有4人参与

这是同一批复性液CM柱纯化所出现的峰型图，请大家帮我看看，为什么两个峰所示的UV值相差大，而且跑出来的峰型重复性很差？？？谢谢

蛋白纯化
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蛋白纯化-1
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1楼 2016-09-22 17:04:26
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zhang001zh

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

两个蛋白峰没有分离开，洗脱梯度没有设计好，重新做连续线性洗脱，优化梯度。复性液中蛋白状态可能会随着时间变化，楼主可以多复性一段时间让里面蛋白状态尽量均一。
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9楼2016-10-17 10:29:40
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1071557849

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

相差大有时候和你两次的的装柱水平不同有关系，或者柱子性能下降了，或者你的上样量、上样速度，洗脱速度等等有关系吧，中间的两个峰，第一个图没怎么分开
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2楼2016-09-29 16:12:03
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风之翼HWX

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 1071557849 at 2016-09-29 16:12:03
相差大有时候和你两次的的装柱水平不同有关系，或者柱子性能下降了，或者你的上样量、上样速度，洗脱速度等等有关系吧，中间的两个峰，第一个图没怎么分开

谢谢！！！上样量、流速、洗脱等的条件是没有变得，柱效测得也在合格范围之内，不过每次使用前柱子的细管子里会有气泡，每次都必须要进行处理，不知道这样会不会影响柱子
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3楼2016-10-08 16:27:40
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ljgangxmc

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 风之翼HWX at 2016-10-08 16:27:40
谢谢！！！上样量、流速、洗脱等的条件是没有变得，柱效测得也在合格范围之内，不过每次使用前柱子的细管子里会有气泡，每次都必须要进行处理，不知道这样会不会影响柱子...

楼主两次层析是连续操作的么？看横坐标像是连续操作的，两次操作有做CIP么？线性梯度和阶段梯度两次完全相同的么？
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4楼2016-10-09 09:47:32
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