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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 跑SDS-PAGE，目的蛋白在30K左右，WB显示目的蛋白在90K左右，跪求大神解释
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枝山征明

铁虫 (小有名气)

[求助] 跑SDS-PAGE，目的蛋白在30K左右，WB显示目的蛋白在90K左右，跪求大神解释 已有2人参与

跑SDS-PAGE，目的蛋白在30K左右，WB显示目的蛋白在90K左右，酵母表达，看文献有说糖基化修饰的原因，跪求大神解释
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1楼 2016-09-21 20:02:00
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erasedasd

新虫 (初入文坛)
我的也是…目的45K跑出来在70K

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2楼2016-09-22 09:29:42
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普通回帖

快乐女孩h

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
枝山征明: 金币+3, ★有帮助 2016-09-22 13:55:59
如果是糖基化修饰的蛋白的分子量会有变化的，而且糖基化蛋白跑出来的条带有点宽盒模糊。
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其实越简单的生活越幸福
3楼2016-09-22 13:22:29
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枝山征明

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 快乐女孩h at 2016-09-22 13:22:29
如果是糖基化修饰的蛋白的分子量会有变化的，而且糖基化蛋白跑出来的条带有点宽盒模糊。

谢谢
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4楼2016-09-22 13:56:26
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kungfu2016

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 枝山征明 at 2016-09-22 13:56:26
谢谢...

有可能形成二聚体或三聚体

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5楼2016-09-24 09:36:23
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枝山征明

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by kungfu2016 at 2016-09-24 09:36:23
有可能形成二聚体或三聚体
...

确实，也有这么说的，那跑胶的时候能打开吗
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6楼2016-09-24 10:14:46
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)
不是杂带？

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7楼2016-09-24 23:24:43
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沉默、颜泪

木虫 (正式写手)
很可能是三聚体，蛋白质的分子量刚好是3倍。并且，即使形成三聚体，30KD也该有蛋白印迹(主带)，90KD次带。

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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

枝山征明
8楼2016-09-25 08:44:05
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star013

新虫 (知名作家)
我们公司可以跑这种胶

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9楼2016-09-25 09:06:17
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我花了18年

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
枝山征明: 金币+3, ★有帮助 2016-09-26 10:27:28
你可以试下做下内源性蛋白WB检测，看看大小和理论上的差异大不大。如果内源蛋白检测没问题，只能是原核表达系统蛋白质翻译时造成。
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做一件事情，没有值不值得，只是想不想。
10楼2016-09-25 09:37:09
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