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枝山征明

铁虫 (小有名气)

[求助] 跑SDS-PAGE,目的蛋白在30K左右,WB显示目的蛋白在90K左右,跪求大神解释 已有2人参与

跑SDS-PAGE,目的蛋白在30K左右,WB显示目的蛋白在90K左右,酵母表达,看文献有说糖基化修饰的原因,跪求大神解释
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erasedasd

新虫 (初入文坛)

我的也是…目的45K跑出来在70K

发自小木虫IOS客户端
2楼2016-09-22 09:29:42
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普通回帖

快乐女孩h

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
枝山征明: 金币+3, 有帮助 2016-09-22 13:55:59
如果是糖基化修饰的蛋白的分子量会有变化的,而且糖基化蛋白跑出来的条带有点宽盒模糊。
其实越简单的生活越幸福
3楼2016-09-22 13:22:29
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枝山征明

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 快乐女孩h at 2016-09-22 13:22:29
如果是糖基化修饰的蛋白的分子量会有变化的,而且糖基化蛋白跑出来的条带有点宽盒模糊。

谢谢
4楼2016-09-22 13:56:26
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kungfu2016

新虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 枝山征明 at 2016-09-22 13:56:26
谢谢...

有可能形成二聚体或三聚体

发自小木虫Android客户端
5楼2016-09-24 09:36:23
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枝山征明

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by kungfu2016 at 2016-09-24 09:36:23
有可能形成二聚体或三聚体
...

确实,也有这么说的,那跑胶的时候能打开吗
6楼2016-09-24 10:14:46
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

7楼2016-09-24 23:24:43
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沉默、颜泪

木虫 (正式写手)

很可能是三聚体,蛋白质的分子量刚好是3倍。并且,即使形成三聚体,30KD也该有蛋白印迹(主带),90KD次带。

发自小木虫Android客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

8楼2016-09-25 08:44:05
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star013

新虫 (知名作家)


9楼2016-09-25 09:06:17
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我花了18年

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
枝山征明: 金币+3, 有帮助 2016-09-26 10:27:28
你可以试下做下内源性蛋白WB检测,看看大小和理论上的差异大不大。如果内源蛋白检测没问题,只能是原核表达系统蛋白质翻译时造成。
做一件事情,没有值不值得,只是想不想。
10楼2016-09-25 09:37:09
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