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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 大提质粒时如何提高质粒浓度？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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熊猫爱吃竹子

新虫 (小有名气)

[求助] 大提质粒时如何提高质粒浓度？ 已有7人参与

用thermo的试剂盒从150ml菌液中提质粒，最后用nano测只有200多ng/ml，别人一般都能提到900ng/ml左右，请问一下有什么需要注意的地方吗，在操作过程中？谢谢

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1楼 2016-09-16 16:50:46
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wilwis

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
13楼: Originally posted by pf790352975 at 2016-09-22 22:16:47
你的质粒浓度单位搞错了，应该是200多ng/ul    假如你浓度测定没问题的话 ，应该是提取的问题，不知道你是高拷贝质粒还是低拷贝质粒，浓度应该至少在1ug/ul

至少在1ug/ul。。。。  请问，你用的哪种试剂盒，最近也一直在提高质粒浓度，只有七八百ug的样子
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18楼2017-11-28 20:19:06
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-09-22 22:20:17
我们大提质粒是自己配试剂直接用碱裂解法提，用的15ml离心管。试剂盒中吸附柱挂载量有限，你可以前面步骤用试剂盒的试剂，不要过柱，用无水乙醇沉淀，得率应该会提高。
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2楼2016-09-18 01:08:51
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liling0601

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们用的天根的试剂盒，150ML的菌液一般能抽1mg左右
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3楼2016-09-18 11:27:11
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010308Jing

木虫 (正式写手)
其实这个跟质粒还是有关系的，你保留点之前的菌液直接扩大会比重新挑克隆好很多

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4楼2016-09-18 11:55:55
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