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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » real time 实时荧光定量PCR结果读不通，求大神看看！！ 指出宝贵的意见和出现的问题
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wo物理

银虫 (初入文坛)

[求助] real time 实时荧光定量PCR结果读不通，求大神看看！！ 指出宝贵的意见和出现的问题 已有2人参与

real time 实时荧光定量PCR结果读不通，求大神看看！！  指出宝贵的意见和出现的问题。
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  • 附件 1 : Bru-2016-09-14标准曲线.pcrd
    • 2016-09-15 00:11:50, 185.57 K

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1楼 2016-09-15 00:12:07
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许彦

木虫 (正式写手)
你用的什么设备，

发自小木虫Android客户端
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2楼2016-09-16 12:13:40
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maboya2008

铜虫 (小有名气)
打不开你的图，截个图呗

发自小木虫Android客户端
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哈
3楼2016-09-17 12:02:56
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wo物理

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 许彦 at 2016-09-16 12:13:40
你用的什么设备，

bio-rad
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4楼2016-09-18 07:54:29
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didongwei

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

最好截个图出来，电脑里没有读取该格式的文件。我通常实验中是在机器上直接看曲线，将不合适的曲线去除后，保存EXCEL格式回到自己的电脑上分析
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不是优秀，而是不可替代
5楼2016-09-18 08:33:58
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pooh0216

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

你这个标曲是不能用的。稀释倍数之间没有呈现梯度。第三个和第四个孔，ct值都差不多了。最后一个孔和阴性对照ct值都差不多了。可能是稀释时候没有处理好，也可能仪器试剂出现误差。你可以打vazyme公司的免费400电话咨询一下，如何更仔细的操作。
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6楼2016-09-18 09:44:46
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许彦

木虫 (正式写手)
内容已删除
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7楼2016-09-18 12:01:45
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pooh0216

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 许彦 at 2016-09-18 12:01:45
如果是你看的这样，我觉得可能是实验室污染了，理论上阴性不应该有曲线吧！
...

理论上NTC是不应该扩增的。但是定量pcr极其灵敏，有ct值也是正常的。一般ct值都在30以后的。只能说明最后一个稀释梯度已经达到和NTC一样的结果了，这个孔的数据也是不能用的
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8楼2016-09-18 13:40:23
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