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rose.no.9木虫 (著名写手)
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[求助]
waters e2695 HPLC使用问题
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做了两天,试了各种办法,请教各位虫友、大侠: 样品是微生物代谢产物的混合物,进样40uL, 线性梯度洗脱10%到90%,检测波长280nm 1、请问不同样品出现相同的峰是什么原因?进了不同的样品,出来的几个峰都是一模一样的,而且从30Min后基线飘得很高(这个通过搜索虫友经验知道是因为甲醇含量变化导致UV吸收变化,但仍不知道怎么校正基线)。开始怀疑是柱子上有残余,但是用纯甲醇冲了半个多小时柱子,又用100%甲醇洗脱进样了10ul甲醇,发现没有那几个峰了;又进了一针样品,那几个峰又出现了!而我自己的样品的峰却没有(实际上我也不知道它们什么样子,因为只要进样就出现那几个峰)。又怀疑是我样品浓度太小,进了一针浓度很大的样品,发现那几个峰被压得很矮但是仍然存在!样品粗提物的质量就那么多,现在是50mg/ml,200ul,如果再浓缩,会不会进样针吸不到样品了呢? 2、纵坐标是AU,能改成mAU吗? |
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