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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 真菌18S 基因克隆的问题
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有涯随无涯

铜虫 (小有名气)

[求助] 真菌18S 基因克隆的问题 已有1人参与

最近各种不顺，在做真菌DGGE后，春花回收后，做基因克隆一直失败，要么是假阳性，要么是根本没有转化子，引物用的是NS1/Fung,载体用的PMD18-T，感受态用的DH5α，什么原因啊，有人知道么？
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吾生也有涯，而知也无涯
1楼 2016-09-13 10:50:49
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有涯随无涯

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by star013 at 2016-09-13 12:33:25
现在都不做dgge啦，都是高通量测序

没办法啊，其实已经做了微生物多样性分析了，但是就是因为是送出去做的，导师就必须让自己再做一次DGGE，纯粹烧钱
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吾生也有涯，而知也无涯
3楼2016-09-13 15:24:28
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star013

新虫 (知名作家)
现在都不做dgge啦，都是高通量测序

发自小木虫Android客户端
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2楼2016-09-13 12:33:25
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star013

新虫 (知名作家)
也是

发自小木虫Android客户端
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4楼2016-09-14 18:33:01
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

T载体自连效率还是蛮高的，你可以把加A后的片段回收之后再连，会好一点
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···
5楼2016-11-09 19:46:05
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