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有涯随无涯

铜虫 (小有名气)

[求助] 真菌18S 基因克隆的问题 已有1人参与

最近各种不顺,在做真菌DGGE后,春花回收后,做基因克隆一直失败,要么是假阳性,要么是根本没有转化子,引物用的是NS1/Fung,载体用的PMD18-T,感受态用的DH5α,什么原因啊,有人知道么?
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吾生也有涯,而知也无涯
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star013

新虫 (知名作家)


现在都不做dgge啦,都是高通量测序

发自小木虫Android客户端
2楼2016-09-13 12:33:25
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有涯随无涯

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by star013 at 2016-09-13 12:33:25
现在都不做dgge啦,都是高通量测序

没办法啊,其实已经做了微生物多样性分析了,但是就是因为是送出去做的,导师就必须让自己再做一次DGGE,纯粹烧钱
吾生也有涯,而知也无涯
3楼2016-09-13 15:24:28
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star013

新虫 (知名作家)


4楼2016-09-14 18:33:01
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

T载体自连效率还是蛮高的,你可以把加A后的片段回收之后再连,会好一点
···
5楼2016-11-09 19:46:05
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