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[求助]
养单克隆细胞出了问题,请各位大神看下这是什么东西?
求助各位大神:真心急急急!!!
约一周前的事情。 本人养的单克隆细胞(于24孔板),最开始没有任何问题。随后几天就发现有虫子样的东西出现(以下简称虫子),近似透明,一头尖,另一头钝圆,大小在10几个细胞到几十个细胞不等,应该不是所说的黑胶虫。当虫子越来越多的时候,细胞也越来越少。(是不是虫子在吃细胞?)虫子不游动,但是会随着培养基的晃动而晃动。刚从培养箱里拿出来的时候很明显,过5-10分钟就看的不是很清楚了。开始的时候怀疑血清有问题,随后更换了全部的实验材料(血清、培养基、24孔板、枪头、超净台),也做了空白对照,证明新的血清和培养基没有问题。可是10号刚刚复苏的新的细胞,离心重悬后观察发现里面居然还有虫子,粗略估计低倍镜下的视野大约有10只虫子。但是没有扔,培养一晚在观察发现,细胞在生长,也铺满了板子,但是虫子还在,11号还算正常,没有影响细胞生长,但是到了12号换了液之后,细胞就变少了。(之前的细胞是传代后发现细胞越来越少,虫子越来越多) 所以最终来看可能是冻存的细胞有问题了?(但愿不是,细胞也挺珍贵的,重新融合要好久,大家都懂得!)
我个人总结了这么几种因素:1.血清 2.1640培养基 3.双抗 4.24孔板+枪头 5.操作环境(超净台) 6.细胞培养箱 7.整个细胞间的大环境 8.个人手法
现在1234都可排除,别人的细胞没有出现这种现象,所以也可以排除6 。至于5、7、8实在是难以确定,因为细胞间有两个超净台,一般不混用,也许我用的超净台有问题?。细胞间中间也是隔开的,大环境有问题别的细胞好好的。所以现在我也很疑惑,到底是怎么了。
后六张是9月10号重新复苏的杂交瘤细胞,虫子还变色了,不过问题依旧存在。而且还与前一批的虫子不太一样了。所以现在就是出现了两种虫子,一种10几个细胞大小的虫子,一种是几百个细胞大小的虫子(可能还吃细胞)。
求大神帮忙解答这是什么虫子,为什么会出现这种情况,该怎么解决? 不甚感激!!!
(图片不是很清除,用手机拍的,不过可以清楚的看到我说的“虫子”。)
![养单克隆细胞出了问题,请各位大神看下这是什么东西?]()
9月9日的细胞,中倍镜,大小约10几个细胞
![养单克隆细胞出了问题,请各位大神看下这是什么东西?-1]()
9月9日的细胞,中倍镜
![养单克隆细胞出了问题,请各位大神看下这是什么东西?-2]()
9月9日的细胞,低倍镜
![养单克隆细胞出了问题,请各位大神看下这是什么东西?-3]()
9月9日的细胞,中倍镜
![养单克隆细胞出了问题,请各位大神看下这是什么东西?-4]()
9月9日的细胞,中倍镜
![养单克隆细胞出了问题,请各位大神看下这是什么东西?-5]()
9月9日的细胞地被镜
![养单克隆细胞出了问题,请各位大神看下这是什么东西?-6]()
9月9日的细胞,中倍镜
![养单克隆细胞出了问题,请各位大神看下这是什么东西?-7]()
9月12号的细胞,虫子的钝端。貌似在吃细胞
![养单克隆细胞出了问题,请各位大神看下这是什么东西?-8]()
9月12号的细胞,虫子的钝端。貌似在吃细胞
![养单克隆细胞出了问题,请各位大神看下这是什么东西?-9]()
9月12号的细胞,虫子的钝端。貌似在吃细胞
![养单克隆细胞出了问题,请各位大神看下这是什么东西?-10]()
9月12号的细胞,虫子的钝端。貌似在吃细胞
![养单克隆细胞出了问题,请各位大神看下这是什么东西?-11]()
9月12号的细胞,虫子的尖端,是不是尾巴?
![养单克隆细胞出了问题,请各位大神看下这是什么东西?-12]()
9月12号的细胞,虫子的尖端,是不是尾巴? |
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