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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 固定化酶 投入到拆分水解反应中，活力回收
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HHHH0099

银虫 (小有名气)

[求助] 固定化酶 投入到拆分水解反应中，活力回收 已有1人参与

现做一批水解拆分反应。
用固定化的脂肪酶拆分，对酶离心回收丙酮清洗，4℃保存被下次备用。
但第二次重复使用活力基本就丧失。
在此想咨询，如果排除固定化效率和紧密性不好的话，可否换掉丙酮采用其他的清洗剂？
有好的推荐的么？
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1楼 2016-09-11 14:27:57
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micropan

新虫 (小有名气)
试试不用清洗，看看第二批的酶活性情况

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2楼2016-09-14 15:15:19
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HHHH0099

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by micropan at 2016-09-14 15:15:19
试试不用清洗，看看第二批的酶活性情况

我第二次就是这么操作的，没有清洗，直接离心保存直接投下批反应。可是我想请问一下，为什么活力有时会变大2-3倍，或许是我认为我HPLC转化率低，导致积分及计算有一定的误差？
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3楼2016-09-18 11:01:41
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micropan

新虫 (小有名气)
可能反应液中底物为不溶性，取样不均一导致的。

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4楼2016-09-20 23:24:06
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strayjuns

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

既然是同样的反应可以完全不用洗涤，不用离心，筛选合适的介质，不建议用水和小分子量的有机溶剂
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国产优质固定化脂肪酶，媲美诺维信435，更高性价比
5楼2017-06-16 10:27:44
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