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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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shelley_1982

金虫 (小有名气)

[交流] 请教原代细胞培养中PERCOLL使用方法

我现在在摸索大鼠肝细胞的原代培养方法,使用灌注法后,发现细胞的存活率低,是否是我灌注时间过久或是胶原酶用量过度?而且我将细胞用100目滤网过滤后,用percoll液分离去除里面的死细胞和其他杂质细胞等,但分离效果不好,请教高手可否告知我应该使用多少密度的percoll,离心时间及转速,如何配制?非常感谢!
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xuemei1984

禁虫 (小有名气)

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4楼2008-11-21 11:46:31
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xuemei1984

禁虫 (小有名气)

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2楼2008-11-20 22:04:32
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shelley_1982

金虫 (小有名气)

谢谢!我再试试!那请问你是用灌注法获得细胞的吗?我的细胞存活率低可能有什么原因呢?
3楼2008-11-21 08:23:49
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shelley_1982

金虫 (小有名气)

是胶原酶4吗?我原来用的0.05%,你一次灌流用多少液体,多少时间啊?我就怕缩短时间消化不充分,并且我一开始就用生理盐水灌,希望能尽量把血细胞冲干净,你呢?
5楼2008-11-21 13:50:31
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