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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 如何将DNA双链变成单链
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fudefenghit

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何将DNA双链变成单链 已有1人参与

在实验里需要将一段DNA单链与引物结合，进行一段时间延伸反应后，想将引物以及延伸的那段序列去掉，重新得到原来的DNA单链模板，求各路大神该怎么做。
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1楼 2016-09-08 09:51:26
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

thetc

木虫 (小有名气)
跑个琼脂低电泳，切胶回收就好了

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加入，希望能学习多一点
10楼2016-09-09 11:11:06
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)
将引物和延伸的那段去掉？不是和之前一样的吗？
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坚持到底就是胜利！
2楼2016-09-08 10:09:51
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fudefenghit

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kuaile5420 at 2016-09-08 10:09:51
将引物和延伸的那段去掉？不是和之前一样的吗？

对，就是要得到原来的那个DNA单链模板。
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3楼2016-09-08 10:31:51
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鲁鲁龙

新虫 (初入文坛)
只用一个引物 再揍柱 就能拿到单链的

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4楼2016-09-08 11:01:01
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)
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3楼: Originally posted by fudefenghit at 2016-09-08 10:31:51
对，就是要得到原来的那个DNA单链模板。...

嗯嗯，我有点不明白，你做延伸的目的是什么？还有就是你这里的DNA单链是怎么来的？RNA逆转录？
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坚持到底就是胜利！
5楼2016-09-08 11:07:02
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fudefenghit

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by kuaile5420 at 2016-09-08 11:07:02
嗯嗯，我有点不明白，你做延伸的目的是什么？还有就是你这里的DNA单链是怎么来的？RNA逆转录？...

DNA单链是通过RCA滚环复制来的，然后做一段延伸是测序用，就是加上引物后测了几十bp后想把这一段序列去掉
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6楼2016-09-08 11:19:35
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by fudefenghit at 2016-09-08 11:19:35
DNA单链是通过RCA滚环复制来的，然后做一段延伸是测序用，就是加上引物后测了几十bp后想把这一段序列去掉...

嗯嗯，是测序结束后想把这些延伸用的引物去掉得到原始DNA单链？
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坚持到底就是胜利！
7楼2016-09-08 15:24:18
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fudefenghit

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by kuaile5420 at 2016-09-08 15:24:18
嗯嗯，是测序结束后想把这些延伸用的引物去掉得到原始DNA单链？...

对的。
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8楼2016-09-08 15:53:05
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fudefenghit

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by kuaile5420 at 2016-09-08 15:24:18
嗯嗯，是测序结束后想把这些延伸用的引物去掉得到原始DNA单链？...

对的。
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9楼2016-09-08 15:53:19
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