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fudefenghit

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何将DNA双链变成单链 已有1人参与

在实验里需要将一段DNA单链与引物结合,进行一段时间延伸反应后,想将引物以及延伸的那段序列去掉,重新得到原来的DNA单链模板,求各路大神该怎么做。
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thetc

木虫 (小有名气)

跑个琼脂低电泳,切胶回收就好了

发自小木虫IOS客户端
加入,希望能学习多一点
10楼2016-09-09 11:11:06
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)

将引物和延伸的那段去掉?不是和之前一样的吗?
坚持到底就是胜利!
2楼2016-09-08 10:09:51
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fudefenghit

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kuaile5420 at 2016-09-08 10:09:51
将引物和延伸的那段去掉?不是和之前一样的吗?

对,就是要得到原来的那个DNA单链模板。
3楼2016-09-08 10:31:51
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鲁鲁龙

新虫 (初入文坛)

只用一个引物 再揍柱 就能拿到单链的

发自小木虫IOS客户端
4楼2016-09-08 11:01:01
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by fudefenghit at 2016-09-08 10:31:51
对,就是要得到原来的那个DNA单链模板。...

嗯嗯,我有点不明白,你做延伸的目的是什么?还有就是你这里的DNA单链是怎么来的?RNA逆转录?
坚持到底就是胜利!
5楼2016-09-08 11:07:02
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fudefenghit

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by kuaile5420 at 2016-09-08 11:07:02
嗯嗯,我有点不明白,你做延伸的目的是什么?还有就是你这里的DNA单链是怎么来的?RNA逆转录?...

DNA单链是通过RCA滚环复制来的,然后做一段延伸是测序用,就是加上引物后测了几十bp后想把这一段序列去掉
6楼2016-09-08 11:19:35
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by fudefenghit at 2016-09-08 11:19:35
DNA单链是通过RCA滚环复制来的,然后做一段延伸是测序用,就是加上引物后测了几十bp后想把这一段序列去掉...

嗯嗯,是测序结束后想把这些延伸用的引物去掉得到原始DNA单链?
坚持到底就是胜利!
7楼2016-09-08 15:24:18
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fudefenghit

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by kuaile5420 at 2016-09-08 15:24:18
嗯嗯,是测序结束后想把这些延伸用的引物去掉得到原始DNA单链?...

对的。
8楼2016-09-08 15:53:05
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fudefenghit

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by kuaile5420 at 2016-09-08 15:24:18
嗯嗯,是测序结束后想把这些延伸用的引物去掉得到原始DNA单链?...

对的。
9楼2016-09-08 15:53:19
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