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静静的顿河1

新虫 (初入文坛)

[求助] 酶标仪滤光片的选择 已有1人参与

用BCA 法检测蛋白浓度,使用仪器为酶标仪。最适波长为 562 nm,但是滤光片只有 550 nm 和 570 nm,该如何选择呢?个人理解使用550nm和570nm 的绿光ianhou吸光值都小于562 nm 处,那是否增大样品浓度或延长孵育时间会价绍误差?  使用550nm和570nm滤光片对最终浓度有多少影响?    哪个滤光片更灵敏?
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
滤光片一般都是有带宽的,比如570±17nm,如果在这个范围内就可以用来做检测,具体有多大影响,你两个都做做,看看是否有区别,没区别说明影响不大,如果有区别看有多大差异。一般有标准品,差异可以被抵消的

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2016-09-08 12:17:37
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静静的顿河1

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by yyy0305 at 2016-09-08 12:17:37
滤光片一般都是有带宽的,比如570±17nm,如果在这个范围内就可以用来做检测,具体有多大影响,你两个都做做,看看是否有区别,没区别说明影响不大,如果有区别看有多大差异。一般有标准品,差异可以被抵消的

谢谢您的讲解。但是我这边两个滤光片都没有,现在需要买一个,二选一,所以是无法两个都做的。标准品抵消是什么意思呢?

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3楼2016-09-08 14:37:49
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静静的顿河1

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yyy0305 at 2016-09-08 12:17:37
滤光片一般都是有带宽的,比如570±17nm,如果在这个范围内就可以用来做检测,具体有多大影响,你两个都做做,看看是否有区别,没区别说明影响不大,如果有区别看有多大差异。一般有标准品,差异可以被抵消的

标准品可以抵消差异,是不是说标准曲线和样品均在562nm或550nm或570nm处检测,在不同波长处得到的值的差值是一定的,对最终样品的浓度影响就很小呢?

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4楼2016-09-08 14:43:09
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 静静的顿河1 at 2016-09-08 14:43:09
标准品可以抵消差异,是不是说标准曲线和样品均在562nm或550nm或570nm处检测,在不同波长处得到的值的差值是一定的,对最终样品的浓度影响就很小呢?
...

这个得做做实验看看了

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5楼2016-09-08 20:14:22
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wzx323

铁虫 (正式写手)

我问的工程师,一般是±25纳米,你两个滤光片都能用,只是不在最佳波长测定,可能有少许差异,但是你的标准牛血清蛋白也是在这个波长,应该没有什么影响。

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奔跑吧蜗牛
6楼2016-09-10 00:48:40
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