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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 免疫实验 » 酶标仪滤光片的选择
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静静的顿河1

新虫 (初入文坛)

[求助] 酶标仪滤光片的选择 已有1人参与

用BCA 法检测蛋白浓度，使用仪器为酶标仪。最适波长为 562 nm，但是滤光片只有 550 nm 和 570 nm，该如何选择呢？个人理解使用550nm和570nm 的绿光ianhou吸光值都小于562 nm 处，那是否增大样品浓度或延长孵育时间会价绍误差？  使用550nm和570nm滤光片对最终浓度有多少影响？    哪个滤光片更灵敏？
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1楼 2016-09-07 22:47:38
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
滤光片一般都是有带宽的，比如570±17nm，如果在这个范围内就可以用来做检测，具体有多大影响，你两个都做做，看看是否有区别，没区别说明影响不大，如果有区别看有多大差异。一般有标准品，差异可以被抵消的
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静静的顿河1
2楼2016-09-08 12:17:37
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静静的顿河1

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by yyy0305 at 2016-09-08 12:17:37
滤光片一般都是有带宽的，比如570±17nm，如果在这个范围内就可以用来做检测，具体有多大影响，你两个都做做，看看是否有区别，没区别说明影响不大，如果有区别看有多大差异。一般有标准品，差异可以被抵消的

谢谢您的讲解。但是我这边两个滤光片都没有，现在需要买一个，二选一，所以是无法两个都做的。标准品抵消是什么意思呢？

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3楼2016-09-08 14:37:49
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静静的顿河1

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yyy0305 at 2016-09-08 12:17:37
滤光片一般都是有带宽的，比如570±17nm，如果在这个范围内就可以用来做检测，具体有多大影响，你两个都做做，看看是否有区别，没区别说明影响不大，如果有区别看有多大差异。一般有标准品，差异可以被抵消的

标准品可以抵消差异，是不是说标准曲线和样品均在562nm或550nm或570nm处检测，在不同波长处得到的值的差值是一定的，对最终样品的浓度影响就很小呢？

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4楼2016-09-08 14:43:09
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 静静的顿河1 at 2016-09-08 14:43:09
标准品可以抵消差异，是不是说标准曲线和样品均在562nm或550nm或570nm处检测，在不同波长处得到的值的差值是一定的，对最终样品的浓度影响就很小呢？
...

这个得做做实验看看了

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5楼2016-09-08 20:14:22
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wzx323

铁虫 (正式写手)
我问的工程师，一般是±25纳米，你两个滤光片都能用，只是不在最佳波长测定，可能有少许差异，但是你的标准牛血清蛋白也是在这个波长，应该没有什么影响。

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奔跑吧蜗牛
6楼2016-09-10 00:48:40
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