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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 用1%的琼脂糖凝胶电泳，跑pcr基因扩增物跑不出来
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huihey

新虫 (初入文坛)

[求助] 用1%的琼脂糖凝胶电泳，跑pcr基因扩增物跑不出来 已有8人参与

用1%的琼脂糖凝胶电泳，跑pcr基因扩增产物，只有marker能跑出来，分了四组，eb什么的都加了，跑了4组

用1%的琼脂糖凝胶电泳，跑pcr基因扩增物跑不出来


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1楼 2016-09-05 19:45:53
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010308Jing

木虫 (正式写手)
有没有引物二聚体或者杂带啊？很有可能是模板的问题

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9楼2016-09-06 18:38:29
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曼陀罗的祈祷

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-09-05 22:37:01
marker能跑出来就代表不是胶的问题，要么是你扩增体系或扩增的问题，1，是否忘记加东西，比如DNTP，比如酶，比如模板，还有，你的模板质量如何？
2.扩增问题的话，你的目标片段大小多少，引物退火温度多少，延伸多长时间，多少循环
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想做个有趣的人，却在逗比的道路上越走越远~
2楼2016-09-05 20:01:03
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huihey

新虫 (初入文坛)
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-06 08:23:14
引用回帖:
2楼: Originally posted by 曼陀罗的祈祷 at 2016-09-05 20:01:03
marker能跑出来就代表不是胶的问题，要么是你扩增体系或扩增的问题，1，是否忘记加东西，比如DNTP，比如酶，比如模板，还有，你的模板质量如何？
2.扩增问题的话，你的目标片段大小多少，引物退火温度多少，延伸多 ...

我都加了阿？操作问题吗？可是我已经试了第五次了，难道是酶不行？dntp 都是新拿出来的
用1%的琼脂糖凝胶电泳，跑pcr基因扩增物跑不出来-1



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3楼2016-09-05 21:03:03
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huihey

新虫 (初入文坛)
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-06 08:23:19
引用回帖:
2楼: Originally posted by 曼陀罗的祈祷 at 2016-09-05 20:01:03
marker能跑出来就代表不是胶的问题，要么是你扩增体系或扩增的问题，1，是否忘记加东西，比如DNTP，比如酶，比如模板，还有，你的模板质量如何？
2.扩增问题的话，你的目标片段大小多少，引物退火温度多少，延伸多 ...

模版是学长配的，应该是没问题吧。。

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4楼2016-09-05 21:05:16
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