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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 板子上长菌，摇菌正常，但PCR无带，非空载也非目的质粒。请问为啥？
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

[求助] 板子上长菌，摇菌正常，但PCR无带，非空载也非目的质粒。请问为啥？ 已有3人参与

同时构建2个质粒，其中1号很正常，是正确的。
2号板子上长菌、摇菌也正常，但PCR时没有带。按理说，如没有目的质粒的话，PCR应该会有空载PCR的一条带(500bp)，但跑胶都没有带，这是什么情况？

1、2号是同时进行实验、操作步骤、使用试剂完全一样。
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1楼 2016-09-05 14:48:34
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010308Jing

木虫 (正式写手)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-06 08:24:00
有可能是假阳性，杂菌

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2楼2016-09-05 19:06:27
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更恋秋风

铁杆木虫 (小有名气)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-06 08:24:07
你可以试试用酶切先验证一下。

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3楼2016-09-05 19:12:46
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wx1308897716

木虫 (小有名气)

神虫

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
鬼羽帝魂: 金币+2, ★有帮助 2016-09-08 16:53:14
PCR的时候做个阳性对照，看看阳性对照可能p出来，也可以做个酶切看看
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4楼2016-09-06 09:51:39
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
鬼羽帝魂: 金币+2, ★有帮助 2016-09-08 16:53:40
多挑几个单克隆试试？
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坚持到底就是胜利！
5楼2016-09-08 10:50:38
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 更恋秋风 at 2016-09-05 19:12:46
你可以试试用酶切先验证一下。

嗯，好的

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6楼2016-09-08 16:51:20
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by kuaile5420 at 2016-09-08 10:50:38
多挑几个单克隆试试？

做了十几个单克隆，都一样没带

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7楼2016-09-08 16:51:58
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wx1308897716 at 2016-09-06 09:51:39
PCR的时候做个阳性对照，看看阳性对照可能p出来，也可以做个酶切看看

感觉不像是这方面的原因，实在头疼

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8楼2016-09-08 16:52:46
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AlexandraWR

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
有可能是PCR的引物不好使，下次带着阳性对照一起P，如果也P不出来就换一对引物试试
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9楼2016-09-08 16:57:17
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