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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

[求助] 板子上长菌,摇菌正常,但PCR无带,非空载也非目的质粒。请问为啥? 已有3人参与

同时构建2个质粒,其中1号很正常,是正确的。
2号板子上长菌、摇菌也正常,但PCR时没有带。按理说,如没有目的质粒的话,PCR应该会有空载PCR的一条带(500bp),但跑胶都没有带,这是什么情况?

1、2号是同时进行实验、操作步骤、使用试剂完全一样。
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010308Jing

木虫 (正式写手)


xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-06 08:24:00
有可能是假阳性,杂菌

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2楼2016-09-05 19:06:27
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更恋秋风

铁杆木虫 (小有名气)


xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-06 08:24:07
你可以试试用酶切先验证一下。

发自小木虫Android客户端
3楼2016-09-05 19:12:46
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wx1308897716

木虫 (小有名气)

神虫

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
鬼羽帝魂: 金币+2, 有帮助 2016-09-08 16:53:14
PCR的时候做个阳性对照,看看阳性对照可能p出来,也可以做个酶切看看
4楼2016-09-06 09:51:39
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
鬼羽帝魂: 金币+2, 有帮助 2016-09-08 16:53:40
多挑几个单克隆试试?
坚持到底就是胜利!
5楼2016-09-08 10:50:38
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 更恋秋风 at 2016-09-05 19:12:46
你可以试试用酶切先验证一下。

嗯,好的

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6楼2016-09-08 16:51:20
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by kuaile5420 at 2016-09-08 10:50:38
多挑几个单克隆试试?

做了十几个单克隆,都一样没带

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7楼2016-09-08 16:51:58
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wx1308897716 at 2016-09-06 09:51:39
PCR的时候做个阳性对照,看看阳性对照可能p出来,也可以做个酶切看看

感觉不像是这方面的原因,实在头疼

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8楼2016-09-08 16:52:46
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AlexandraWR

银虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
有可能是PCR的引物不好使,下次带着阳性对照一起P,如果也P不出来就换一对引物试试
9楼2016-09-08 16:57:17
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