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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 蛋白纯化
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18242016312

新虫 (小有名气)

[交流] 蛋白纯化

用的载体是Pet30a，蛋白诱导出来了，但是纯化出了问题，先用50mM的咪唑漂洗，最后用400mM咪唑洗脱，结果没有蛋白，在50mM咪唑漂洗却有蛋白。所再次纯化，先用10mM，再用20mM咪唑漂洗，最后用400咪唑洗脱，还是没有纯化到蛋白，求助，这是怎么回事？有什么解决办法呢？

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1楼 2016-09-04 15:35:10
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杨仔儿

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-05 08:14:19
蛋白和柱子结合的不牢固吧，换一个柱子或者结合时间长一点试一试

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5楼2016-09-04 17:17:37
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普通回帖

超级老快
★
18242016312(金币+1): 谢谢参与
2楼2016-09-04 16:01:36
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bigbear8703
★
18242016312(金币+1): 谢谢参与
3楼2016-09-04 16:04:35
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天涯2012
4楼2016-09-04 16:27:36
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kangaroo0513

新虫 (正式写手)
摸摸头。。。。
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6楼2016-09-05 19:00:40
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更恋秋风

铁杆木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
把梯度缩小一点试试，10-20-30-50-250-400，另外在结合这一步，可以尝试共孵育1h

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7楼2016-09-05 19:10:43
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18242016312

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 更恋秋风 at 2016-09-05 19:10:43
把梯度缩小一点试试，10-20-30-50-250-400，另外在结合这一步，可以尝试共孵育1h

共孵育什么意思？怎么做？

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8楼2016-09-06 02:05:47
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匿名
本帖仅楼主可见
9楼2016-09-06 07:43:14
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jqsce59
祝福
10楼2016-09-06 07:59:56
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