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ohc1414

木虫 (正式写手)

[交流] 考马斯亮蓝法测辣根过氧化物酶的载酶量

做固定化酶,选择的酶是HRP,要算载酶量,初步利用的方法定为考马斯亮蓝,可是做标曲时有些疑惑,为什么文献上是用牛血清白蛋白,而不是直接用Hrp做标曲,这样做的目的是什么?能直接用HRP做标曲吗?谢谢

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ohc1414

木虫 (正式写手)

2楼2016-09-02 14:35:31
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kaobo2012

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
ohc1414: 金币+10, 谢谢 2016-09-03 08:13:37
有HRP标准品,你可以用这个标准品做标准曲线。没有这个标准品,才用BSA做标准品的。如果实验要求不严格,你可以自己用BSA标准品来标定HRP,作为后续实验的标准品。
3楼2016-09-02 23:39:32
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ohc1414

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by kaobo2012 at 2016-09-02 23:39:32
有HRP标准品,你可以用这个标准品做标准曲线。没有这个标准品,才用BSA做标准品的。如果实验要求不严格,你可以自己用BSA标准品来标定HRP,作为后续实验的标准品。

还有一个小问题,他们溶解酶时,有用0.1mol/l nacl溶液的,也有用0.1mol/l 磷酸缓冲液的,请问都可以还是有哪个好些,再次谢谢!

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4楼2016-09-03 08:18:58
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kaobo2012

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
就我的经验,两都都可以的。但还要看你的实验目的。氯化钠溶液不具有缓冲能力,可能会导致你的酶失活。磷酸盐具有一定的缓冲能力,可以保护酶的活力。但也不一定,有的酶在磷酸盐缓冲液中就没有活性,在Tris-HCl中才有活性。这个我也遇到过。所以,还是要看你实验的目的。
5楼2016-09-03 19:44:56
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ohc1414

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by kaobo2012 at 2016-09-03 19:44:56
就我的经验,两都都可以的。但还要看你的实验目的。氯化钠溶液不具有缓冲能力,可能会导致你的酶失活。磷酸盐具有一定的缓冲能力,可以保护酶的活力。但也不一定,有的酶在磷酸盐缓冲液中就没有活性,在Tris-HCl中才 ...

好的,谢谢

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6楼2016-09-04 08:15:59
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清茶独尝

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以用HRP做标曲吧

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7楼2016-11-04 20:32:12
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