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canghaiyili木虫 (正式写手)
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[交流]
检测发酵液中的磷元素的方法？
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| 路过的高手帮助一下，想检测发酵液中所含的磷元素，看看有什么可行的方法，大家多给点意见，最好附带文献，在这先谢谢了！ |
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磷的测定方法 1.原理 食物中的有机物经酸氧化分解，使磷在酸性条件下与钼酸铵结合生成磷钼酸铵。 此化合物经对苯二酚、亚硫酸钠还原成兰色化合物--钼蓝。用分光光度计在波长660nm处测定钼蓝的吸光值，以测定磷的含量。反应式为： H3PO4+12（NH4）3MoO4+21HNO3→（NH4）3PO4·12MoO3+21NH4NO3+12H2O 2.适用范围 依据中华人民共和国国家标准：GB12393-90， 此方法适用于所有食品及保健品中磷元素含量的测定。 3.仪器 722可见分光光度计 4.试剂 （1） 硝酸(G.R)， 高氯酸(G.R) 硫酸（A.R） （2） 混合酸消化液：硝酸+高氯酸 按4+1混合 （3） 15%（V/V）硫酸溶液：取15ml硫酸缓慢加入到80ml水中，并定容至100ml。 （4） 5%（W/V）钼酸铵溶液：取5g钼酸铵，用15%硫酸溶液稀释至100ml。 （5） 对苯二酚溶液：取0.5g对苯二酚于100ml水中，溶解后加一滴浓硫酸。 （6） 20%（W/V）亚硫酸钠溶液（注：此溶液需在每次实验前临时配制）：称取一定量的亚硫酸钠，用蒸馏水溶解即可。 （7） 标准质控物：猪肝粉（国家标准物质研究中心提供），质控物需室温干燥保存。 （8） 国家标准物质中心提供：磷标准储备溶液，浓度为1000μg/mL （9） 标准中间液的配制：吸取1ml磷标准储备溶液，然后移入100ml容量瓶中，用去离子水定容至100ml ，浓度为10mg/L 5. 操作步骤 5.1样品消化：实验操作需在无元素污染的环境中进行。准确称取样品干样（0.3-0.7g左右）,湿样(1.0g左右),饮料等其他液体样品 (1.0-2.0g左右),然后将其放入50ml消化管中, 加混酸15ml（油样或含糖量高的食品可多加些酸）,过夜。次日，将消化管放入消化炉中，消化开始时可将温度调低（约130℃左右），然后逐步将温度调高（最终调至240℃左右）进行消化，一直消化到样品冒白烟液体变成无色或黄绿色为止。若样品未消化完全可再加几毫升混酸，直到消化完全。消化完后，待凉，再加5ml去离子水，继续加热，直到消化管中的液体约剩2ml左右，取下，放凉，然后转移至10ml试管中，再用去离子水冲洗消化管2-3次，并最终定容至10ml。 样品进行消化时，应同时做样品空白消化。 5.2磷标准曲线：分别吸取标准储备液1.0ml、3.0ml、5.0ml至20ml刻度试管中，然后依次加入2ml钼酸铵溶液、1ml亚硫酸钠溶液、1ml对苯二酚溶液，加蒸馏水定容至20ml，混匀，静置30分钟，在波长660nm处测定其吸光度，由此计算出回归系数，利用回归方程计算或绘制成校正曲线。 5.3测定：取样品及空白液各2ml分别至20ml试管中，然后依次加入2ml钼酸铵溶液、1ml亚硫酸钠溶液、1ml对苯二酚溶液，加蒸馏水定容至20ml，混匀，静置30分钟，在波长660nm处测定其吸光度，并根据测出的吸光度在标准曲线上算得未知溶液中的磷含量。 6.计算 X (mg/100g) = （C∕m ）×（V1∕V2 ）×100 式中：X----样品中磷含量，mg/100g C----由标准曲线及回归方程算得样品测定液中磷含量，mg m---称样量 g V1---消化液定溶总体积，ml V2-测定用消化液的体积，ml 此元素最低检出限为2μg 7. 注意事项 （1） 亚硫酸钠溶液最好每次实验前临时配制，否则可能会使钼蓝溶液发生浑浊。 （2） 其次定容完后，静置时间不亦过长，否则溶液颜色将会加深，其结果不准确。 |
7楼2008-11-28 12:53:58
lwfying
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2楼2008-11-18 21:01:02
北斗星星
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3楼2008-11-18 22:51:58
yangpzhang
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4楼2008-11-19 08:27:09
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