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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 检测发酵液中的磷元素的方法？
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canghaiyili

木虫 (正式写手)

[交流] 检测发酵液中的磷元素的方法？

路过的高手帮助一下，想检测发酵液中所含的磷元素，看看有什么可行的方法，大家多给点意见，最好附带文献，在这先谢谢了！
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1楼 2008-11-18 18:01:31
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lwfying

木虫 (小有名气)

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★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
canghaiyili(金币+8,VIP+0):谢谢
发酵液中含有大量的微生物和有机物，首先必须将发酵液进行硝化，使其完全转化成无机物，然后取硝化液，用磷钼蓝比色方法测量消化液中的磷含量。其详细方法需参考水中磷含量测定，随便一本无机分析中都有。
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2楼2008-11-18 21:01:02
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北斗星星

至尊木虫 (知名作家)

老版主
★ ★ ★ ★
canghaiyili(金币+4,VIP+0):谢了
当然啦，可以用钼蓝比色法测定阿，
或者用HPLC法选用“氮磷检测器”
不过，你的样品需要前处理，我看用楼上的方法就行
其他的按我说的做就行
我做药物分析时用过这两种方法
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大步向前
3楼2008-11-18 22:51:58
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yangpzhang

铁虫 (初入文坛)
★
canghaiyili(金币+1,VIP+0):多谢
如上面几位虫友所说，应该首先将发酵液硝化，然后用ICP-AES测定即可
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4楼2008-11-19 08:27:09
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lwfying

木虫 (小有名气)

回复

可以采用硝化蛋白质的方法：大概是取定量的发酵液与长颈园底烧瓶中，加热将水分完全蒸发至干，然后加入少量浓硫酸和硫酸钾以及极少量的硫酸铜加热至烧瓶内的有机物完全转变成无机物，溶液变澄清为止。将溶液转移定容后就可以按一般程序测定磷含量。
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5楼2008-11-19 21:53:44
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dx109

铁杆木虫 (著名写手)
这个应该像楼上说的先硝化，然后根据里面的P含量范围进行测定，如果含量少可以用比色法，但要注意PH的控制；如果含量高，可以考虑用奎钼柠酮沉淀，通过重量法来测定。
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6楼2008-11-28 11:32:39
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caress0824

银虫 (小有名气)
磷的测定方法
1.原理
食物中的有机物经酸氧化分解，使磷在酸性条件下与钼酸铵结合生成磷钼酸铵。 此化合物经对苯二酚、亚硫酸钠还原成兰色化合物--钼蓝。用分光光度计在波长660nm处测定钼蓝的吸光值，以测定磷的含量。反应式为：
H3PO4+12（NH4）3MoO4+21HNO3→（NH4）3PO4·12MoO3+21NH4NO3+12H2O
2.适用范围
依据中华人民共和国国家标准：GB12393-90， 此方法适用于所有食品及保健品中磷元素含量的测定。
3.仪器
722可见分光光度计
4.试剂
（1） 硝酸(G.R)， 高氯酸(G.R) 硫酸（A.R）
（2） 混合酸消化液：硝酸+高氯酸 按4+1混合
（3） 15%（V/V）硫酸溶液：取15ml硫酸缓慢加入到80ml水中，并定容至100ml。
（4） 5%（W/V）钼酸铵溶液：取5g钼酸铵，用15%硫酸溶液稀释至100ml。
（5） 对苯二酚溶液：取0.5g对苯二酚于100ml水中，溶解后加一滴浓硫酸。
（6） 20%（W/V）亚硫酸钠溶液（注：此溶液需在每次实验前临时配制）：称取一定量的亚硫酸钠，用蒸馏水溶解即可。
（7） 标准质控物：猪肝粉（国家标准物质研究中心提供），质控物需室温干燥保存。
（8） 国家标准物质中心提供：磷标准储备溶液，浓度为1000μg/mL
（9） 标准中间液的配制：吸取1ml磷标准储备溶液，然后移入100ml容量瓶中，用去离子水定容至100ml ，浓度为10mg/L
5. 操作步骤
5.1样品消化：实验操作需在无元素污染的环境中进行。准确称取样品干样（0.3-0.7g左右）,湿样(1.0g左右),饮料等其他液体样品 (1.0-2.0g左右),然后将其放入50ml消化管中, 加混酸15ml（油样或含糖量高的食品可多加些酸）,过夜。次日，将消化管放入消化炉中，消化开始时可将温度调低（约130℃左右），然后逐步将温度调高（最终调至240℃左右）进行消化，一直消化到样品冒白烟液体变成无色或黄绿色为止。若样品未消化完全可再加几毫升混酸，直到消化完全。消化完后，待凉，再加5ml去离子水，继续加热，直到消化管中的液体约剩2ml左右，取下，放凉，然后转移至10ml试管中，再用去离子水冲洗消化管2-3次，并最终定容至10ml。
样品进行消化时，应同时做样品空白消化。
5.2磷标准曲线：分别吸取标准储备液1.0ml、3.0ml、5.0ml至20ml刻度试管中，然后依次加入2ml钼酸铵溶液、1ml亚硫酸钠溶液、1ml对苯二酚溶液，加蒸馏水定容至20ml，混匀，静置30分钟，在波长660nm处测定其吸光度，由此计算出回归系数，利用回归方程计算或绘制成校正曲线。
5.3测定：取样品及空白液各2ml分别至20ml试管中，然后依次加入2ml钼酸铵溶液、1ml亚硫酸钠溶液、1ml对苯二酚溶液，加蒸馏水定容至20ml，混匀，静置30分钟，在波长660nm处测定其吸光度，并根据测出的吸光度在标准曲线上算得未知溶液中的磷含量。
6.计算
X (mg/100g) = （C∕m ）×（V1∕V2 ）×100
式中：X----样品中磷含量，mg/100g
C----由标准曲线及回归方程算得样品测定液中磷含量，mg
m---称样量 g
V1---消化液定溶总体积，ml
V2-测定用消化液的体积，ml
此元素最低检出限为2μg
7. 注意事项
（1） 亚硫酸钠溶液最好每次实验前临时配制，否则可能会使钼蓝溶液发生浑浊。
（2） 其次定容完后，静置时间不亦过长，否则溶液颜色将会加深，其结果不准确。
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7楼2008-11-28 12:53:58
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uliya809

木虫 (正式写手)
GC-氮磷检测器
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8楼2008-11-29 10:27:52
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