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青草悠悠1234

铁虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 3852917
注册: 2015-05-06

[求助] 高效液相色谱分析已有1人参与

各位前辈们：你们好，我第一次做多肽蛋白质标品时，出峰时间16分钟，第二次在同样条件做，出峰时间5分钟，俩次分析之间做过人参皂甙的分析，本人猜想是柱子没冲干净，用纯甲醇冲洗是出现以下图，原因是什么？
多肽分析条件：  A 水+0.1%TFA B  乙腈+0.1%TFA
时间    0          5             20
A       80       80             30
B       20          20             70

P60825-164949.jpg

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1楼 2016-08-26 13:31:38

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青草悠悠1234

铁虫 (小有名气)

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引用回帖:

11楼: Originally posted by w9412 at 2016-09-01 15:08:13
如果排除样品问题，没出峰，我只能怀疑样品没进到柱子上去，所以才造成这个现象。还是建议你重复做一两次，梯度没必要优化么？可以的话，可以尝试一下。

如果梯度可以更改的话：
先30min内B相比例从5%走到90%， ...

嗯嗯，谢谢指导。还有一问题就是设置流速是1ml/min时，用量筒测量承接5min,只有2.5ml的液体，这是什么原因呢？是不是与此相关