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tianya716

木虫 (正式写手)


[交流] 色谱高手请帮忙---基线不平问题!万分感谢!

各位老师好:我想请教梯度洗脱跑基线时总是出一个鼓包峰的问题,
        我的流动相A是PH3.2的盐,B是PH3.2的盐和乙腈的混合液(30:70),前20分钟A流动相由50%线性降低到7%,再在7%保持10分钟,可在22分钟总是出现一个鼓包峰,基线怎么跑都是出线这个鼓包峰,请高手帮忙解决,万分感激!


色谱条件我是参照欧洲药典6.0做的,原文如下:
—  size: l = 0.15 m, Ø = 4.6 mm,
—  stationary phase: silica gel for chromatography, alkyl-bonded for use with highly aqueous mobile phases R (5 µm),
—  temperature: 45 °C.
Mobile phase:
—  mobile phase A: 4.0 g/l solution of potassium dihydrogen phosphate R adjusted to pH 3.2 with dilute phosphoric acid R;
—  mobile phase B: mobile phase A, acetonitrile R (300:700 V/V);

Time(min)        Mobile phase A(per cent V/V)        Mobile phase B(per cent V/V)
0 - 20          50 → 7                                            50 → 93
20 - 30                7                                                93
Flow rate: 1.5 ml/min.
Detection: spectrophotometer at 240 nm.
Injection: 10 ul

[ Last edited by tianya716 on 2008-11-17 at 21:10 ]
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kkbyb

木虫 (著名写手)

设参比波长
2楼2008-11-17 22:04:02
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tianya716

木虫 (正式写手)


我是个新手,不知道怎么设参比波长,我用的是岛津20AT的液相,能设参比波长吗?
3楼2008-11-17 23:17:53
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tianya716

木虫 (正式写手)


我是个新手,不知道怎么设参比波长,我用的是岛津20AT的液相,能设参比波长吗?
4楼2008-11-17 23:18:51
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赵新416

银虫 (正式写手)



tianya716(金币+1,VIP+0):谢谢指点!
可能是溶剂峰,做一个空白试试,查明白溶剂峰的检测波长,避开就是了
5楼2008-11-18 09:33:06
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lonely8032

铁虫 (初入文坛)


xiaohezi7844(金币+1,VIP+0):thanks
先用流动相冲洗柱子半个小时,速度可以慢慢调上来,如果最后还是有的话,就做个空白实验,用溶剂进一针看看。
6楼2008-11-18 09:47:39
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lonely8032

铁虫 (初入文坛)

要排除一切可能影响的因素


tianya716(金币+1,VIP+0):谢谢指点!
柱子是干净的。
7楼2008-11-18 09:52:07
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landi9568

铜虫 (小有名气)


xiaohezi7844(金币+1,VIP+0):thanks
溶剂峰,做个空白就能解决了
8楼2008-11-18 09:56:31
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jixf_1114

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
tianya716(金币+5,VIP+0):谢谢指点!
多半是因为梯度变化的时候产生的鬼峰,把水或缓冲盐换其他厂家的试试,如果不影响你分析就算了。
个人经历判断这个不容易去掉
9楼2008-11-18 11:52:04
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tianya716

木虫 (正式写手)


谢谢大家的热心解答,

你们解答说多半是溶解峰,做空白能解决,可我不知怎么做空白啊?万分盼望有虫友指点!
因为我是在跑基线出大鼓包峰,空白怎么做呢?直接进溶剂为空白?
10楼2008-11-18 17:30:21
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