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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » DNA 是否可以在60度条件下杂交？
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xiu_chem

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] DNA 是否可以在60度条件下杂交？

DNA 是否可以在60度条件下杂交？

请高手指点一下，谢谢！
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1楼 2008-11-17 20:13:04
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wzhzhc

银虫 (初入文坛)
★
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-11 19:26
关键是要看你的杂交液和探针的TM值，
如果杂交液中有变性剂，如甲酰胺等，那杂交温度要稍微低一些。
还有要是探针比较短，推荐在较低温度下进行。
总之，杂交既要保证较强的杂交信号，也要保证特异性！
我自己做了很长时间的杂交试验，有问题还可以进一步讨论。
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4楼2008-11-18 08:31:12
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
可以~
比如PCR的时候引物退火温度也有60度的
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2楼2008-11-17 20:45:05
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xiu_chem

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by wzhzhc at 2008-11-18 08:31:
关键是要看你的杂交液和探针的TM值，
如果杂交液中有变性剂，如甲酰胺等，那杂交温度要稍微低一些。
还有要是探针比较短，推荐在较低温度下进行。
总之，杂交既要保证较强的杂交信号，也要保证特异性！
我自己 ...

谢谢各位的帮助！

我主要是做分析的，对生物方面不是很懂，在DNA杂交实验条件的优化中，

我从15度开始一直做到80度，时间都是30分钟，发现在60度条件下信号最

强，也就是杂交得最完全。这样做有没有问题？因为我听有些人说DNA杂交

一般都是在较低温度，比如30度左右进行，我怕我做出的最好条件是在60度，

会不会闹笑话？请各位帮我分析一下，谢谢大家！
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5楼2008-11-18 12:54:50
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
一般来说，杂交温度越高，特异性越强
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6楼2008-11-18 13:53:44
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