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xiu_chem

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] DNA 是否可以在60度条件下杂交?

DNA 是否可以在60度条件下杂交?

请高手指点一下,谢谢!
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

可以~
比如PCR的时候引物退火温度也有60度的
2楼2008-11-17 20:45:05
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

可以 没有问题
3楼2008-11-17 22:10:48
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wzhzhc

银虫 (初入文坛)



司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-11 19:26
关键是要看你的杂交液和探针的TM值,
如果杂交液中有变性剂,如甲酰胺等,那杂交温度要稍微低一些。
还有要是探针比较短,推荐在较低温度下进行。
总之,杂交既要保证较强的杂交信号,也要保证特异性!
我自己做了很长时间的杂交试验,有问题还可以进一步讨论。
4楼2008-11-18 08:31:12
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xiu_chem

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by wzhzhc at 2008-11-18 08:31:
关键是要看你的杂交液和探针的TM值,
如果杂交液中有变性剂,如甲酰胺等,那杂交温度要稍微低一些。
还有要是探针比较短,推荐在较低温度下进行。
总之,杂交既要保证较强的杂交信号,也要保证特异性!
我自己 ...

谢谢各位的帮助!

我主要是做分析的,对生物方面不是很懂,在DNA杂交实验条件的优化中,

我从15度开始一直做到80度,时间都是30分钟,发现在60度条件下信号最

强,也就是杂交得最完全。这样做有没有问题?因为我听有些人说DNA杂交

一般都是在较低温度,比如30度左右进行,我怕我做出的最好条件是在60度,

会不会闹笑话?请各位帮我分析一下,谢谢大家!
5楼2008-11-18 12:54:50
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

一般来说,杂交温度越高,特异性越强
6楼2008-11-18 13:53:44
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