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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 碳水化合物 » 利用分子筛sephacryl s-400柱子分离纯化多糖
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小橄榄999

新虫 (初入文坛)

[求助] 利用分子筛sephacryl s-400柱子分离纯化多糖 已有4人参与

我想问下，大家平时用分子筛sephacryl S-400分离纯化多糖的时候，用什么作为清洗剂来清洗柱子的，我用0.2M NaOH清洗的柱子，可是发现进了几次样后，柱子的柱校降低了，请问什么可以将柱子里的多糖清洗干净？
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1楼 2016-08-20 14:50:46
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cgjlove

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小橄榄999 at 2016-08-20 20:38:07
我的多糖样品挂柱子的效果好像比较严重，进几次样后，柱压会增加，所以必须进行大洗，然后0.2M NaOH好像洗不太干净，所以想咨询下大家一般用什么进行洗涤sephacryl 的柱子？...

我想问下你多糖上样前过膜了没？
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4楼2016-08-20 22:07:07
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cgjlove

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
小橄榄999: 金币+1 2016-08-22 14:40:42
引用回帖:
5楼: Originally posted by 小橄榄999 at 2016-08-22 09:15:36
恩恩，过膜了，还离心了的...

那我也不太清楚什么你的糖会挂柱子了。
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7楼2016-08-22 11:53:43
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hc-material

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★
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小橄榄999: 金币+1 2016-08-26 14:38:43
若上样的样品里面没有固形物，柱子堵了，就用70%乙醇洗啊
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11楼2016-08-22 15:38:29
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cgjlove

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我用的是Sephadex G-100纯化的多糖，每次过完柱子直接用洗脱液继续冲洗2-3h继续上样，一般不堵不会用NaOH冲洗。我觉得分子筛是根据分子量大小分离原理，不像离子交换树脂。因此不会残留其他东西在柱子里因此不用每次都用NaOH冲洗。
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2楼2016-08-20 15:14:23
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小橄榄999

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cgjlove at 2016-08-20 15:14:23
我用的是Sephadex G-100纯化的多糖，每次过完柱子直接用洗脱液继续冲洗2-3h继续上样，一般不堵不会用NaOH冲洗。我觉得分子筛是根据分子量大小分离原理，不像离子交换树脂。因此不会残留其他东西在柱子里因此不用每次 ...

我的多糖样品挂柱子的效果好像比较严重，进几次样后，柱压会增加，所以必须进行大洗，然后0.2M NaOH好像洗不太干净，所以想咨询下大家一般用什么进行洗涤sephacryl 的柱子？
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3楼2016-08-20 20:38:07
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小橄榄999

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cgjlove at 2016-08-20 22:07:07
我想问下你多糖上样前过膜了没？...

恩恩，过膜了，还离心了的
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5楼2016-08-22 09:15:36
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qingxiayuan

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小橄榄999: 金币+1 2016-08-26 14:38:58
我用0.5M的NaOH洗
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6楼2016-08-22 10:14:39
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zinfly

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小橄榄999: 金币+1 2016-08-26 14:39:09
http://wenku.baidu.com/view/e0f4ea8b227916888486d7c5.html?re=view
使用说明书，page 9，50-100mL 0.2-0.5M NaOH
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8楼2016-08-22 13:19:25
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小橄榄999

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by qingxiayuan at 2016-08-22 10:14:39
我用0.5M的NaOH洗

您用的也是sephacryl s-400的柱子分离不同分子量片段的多糖吗？您用0.5M NaOH洗柱子的话，一般洗几个柱体积？
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9楼2016-08-22 14:28:21
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小橄榄999

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by zinfly at 2016-08-22 13:19:25
http://wenku.baidu.com/view/e0f4ea8b227916888486d7c5.html?re=view
使用说明书，page 9，50-100mL 0.2-0.5M NaOH

您试过用这个方法洗吗？我的柱子的柱体积大概有320ml，柱子的说明书上写的常规的清洗用0.2MNaOH，如果柱子堵的比较厉害的时候才用0.5MNaOH洗，我的柱子没堵，不太敢用比较大的NaOH洗，怕洗多了，对柱子里的填料不太好，您觉得呢？
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10楼2016-08-22 14:39:08
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