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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » DNS法测α-淀粉酶，一直没有测出产物峰
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年岁无往

铁虫 (初入文坛)

[求助] DNS法测α-淀粉酶，一直没有测出产物峰

我用的α-淀粉酶（来源于猪胰腺），底物为玉米淀粉，淀粉天青，可溶性淀粉，DNS显色剂我按照网上最常见的配方配了两种。按照文献所说，淀粉酶应该和淀粉反应，生成糊精和少量麦芽糖，这些还原性糖会和DNS中的3，5-二硝基水杨酸反应生成棕红色物质，在540nm处有吸收峰。但是我做了很多组不同的浓度配比，试了很多种实验条件，一直没有得到产物峰，想求助大神们帮我看看是哪里的问题。
我现在的实验操作，0.5ml 20u/ml酶液，0.5ml 1%淀粉（三种都有），淀粉进行预糊化后使用。酶和底物反应3min后，加入1mlDNS显色剂，煮沸8min，加纯水10ml稀释后用酶标仪石英板测定OD值。
谢谢各位！@hc-material@gyesang
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1楼 2016-08-20 14:40:11
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年岁无往

铁虫 (初入文坛)
求助啊

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2楼2016-08-21 23:36:12
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幸运的luoyii

新虫 (初入文坛)
1mlDNS太少了.酶可能失活了。要低温避光

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3楼2016-09-20 21:32:54
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年岁无往

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 幸运的luoyii at 2016-09-20 21:32:54
1mlDNS太少了.酶可能失活了。要低温避光

我用的DNS是未稀释十倍的DNS，浓度比较高；酶是新买的，应该不存在失活的问题；实验过程中有注意低温避光，但是得到的结果还是不好。请您帮我看看还有没有其他方面的问题？
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4楼2017-04-03 15:10:19
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shitouszx

新虫 (初入文坛)
我想问一下，你们的淀粉天青采购于哪里，能不能给我个联系方式，或者厂家，跪谢，我的邮箱号码 shitouszx@163.com
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5楼2020-08-24 14:09:29
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