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年岁无往

铁虫 (初入文坛)

[求助] DNS法测α-淀粉酶,一直没有测出产物峰

我用的α-淀粉酶(来源于猪胰腺),底物为玉米淀粉,淀粉天青,可溶性淀粉,DNS显色剂我按照网上最常见的配方配了两种。按照文献所说,淀粉酶应该和淀粉反应,生成糊精和少量麦芽糖,这些还原性糖会和DNS中的3,5-二硝基水杨酸反应生成棕红色物质,在540nm处有吸收峰。但是我做了很多组不同的浓度配比,试了很多种实验条件,一直没有得到产物峰,想求助大神们帮我看看是哪里的问题。
我现在的实验操作,0.5ml 20u/ml酶液,0.5ml 1%淀粉(三种都有),淀粉进行预糊化后使用。酶和底物反应3min后,加入1mlDNS显色剂,煮沸8min,加纯水10ml稀释后用酶标仪石英板测定OD值。
谢谢各位!@hc-material@gyesang
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年岁无往

铁虫 (初入文坛)

2楼2016-08-21 23:36:12
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幸运的luoyii

新虫 (初入文坛)

1mlDNS太少了.酶可能失活了。要低温避光

发自小木虫Android客户端
3楼2016-09-20 21:32:54
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年岁无往

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 幸运的luoyii at 2016-09-20 21:32:54
1mlDNS太少了.酶可能失活了。要低温避光

我用的DNS是未稀释十倍的DNS,浓度比较高;酶是新买的,应该不存在失活的问题;实验过程中有注意低温避光,但是得到的结果还是不好。请您帮我看看还有没有其他方面的问题?
4楼2017-04-03 15:10:19
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shitouszx

新虫 (初入文坛)

我想问一下,你们的淀粉天青采购于哪里,能不能给我个联系方式,或者厂家,跪谢,我的邮箱号码 shitouszx@163.com
5楼2020-08-24 14:09:29
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