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DNS法测α-淀粉酶,一直没有测出产物峰
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我用的α-淀粉酶(来源于猪胰腺),底物为玉米淀粉,淀粉天青,可溶性淀粉,DNS显色剂我按照网上最常见的配方配了两种。按照文献所说,淀粉酶应该和淀粉反应,生成糊精和少量麦芽糖,这些还原性糖会和DNS中的3,5-二硝基水杨酸反应生成棕红色物质,在540nm处有吸收峰。但是我做了很多组不同的浓度配比,试了很多种实验条件,一直没有得到产物峰,想求助大神们帮我看看是哪里的问题。 我现在的实验操作,0.5ml 20u/ml酶液,0.5ml 1%淀粉(三种都有),淀粉进行预糊化后使用。酶和底物反应3min后,加入1mlDNS显色剂,煮沸8min,加纯水10ml稀释后用酶标仪石英板测定OD值。 谢谢各位!@hc-material@gyesang |
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