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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如何构建载体
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点瓣心音

木虫 (小有名气)

[求助] 如何构建载体 已有3人参与

构建载体，需要用哪个软件来设计，如何在载体上构建酶切位点。

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1楼 2016-08-18 11:22:38
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

werq63

金虫 (著名写手)
用snapgene看质粒序列，用primer5设计引物，再用snapgene看看引物匹配程度，用snapgene看有没有移码突变。

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4楼2016-08-19 14:22:47
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PRIMER5.0.............
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采菊东篱下，悠然见南山。
2楼2016-08-18 11:28:40
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曼陀罗的祈祷

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
原核表达吗？
我按照原核表达来说吧

首先，确定你要用哪个载体，然后找载体上的酶切位点，我是用primer5查的酶切位点，要选的酶切位点必须是载体多克隆位点上有，而你的片段上没有的酶切位点，选好后设计引物，在你的片段两端加酶切位点，然后pcr回收片段连载体就行了，中间特别需要注意的就是连接体系里载体和目的片段的比例，其他没什么了
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想做个有趣的人，却在逗比的道路上越走越远~
6楼2016-08-19 20:59:41
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普通回帖

wzm小情绪

新虫 (正式写手)
我也在弄，我也不会，能交流下么

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3楼2016-08-18 13:39:48
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绿松石6727

新虫 (小有名气)
DNAMAN挺好用的

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5楼2016-08-19 18:37:22
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kangaroo0513

新虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 曼陀罗的祈祷 at 2016-08-19 20:59:41
原核表达吗？
我按照原核表达来说吧

首先，确定你要用哪个载体，然后找载体上的酶切位点，我是用primer5查的酶切位点，要选的酶切位点必须是载体多克隆位点上有，而你的片段上没有的酶切位点，选好后设计引物， ...

汪~~~
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7楼2016-08-19 22:55:03
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曼陀罗的祈祷

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by kangaroo0513 at 2016-08-19 22:55:03
汪~~~...

汪汪汪
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想做个有趣的人，却在逗比的道路上越走越远~
8楼2016-08-20 12:08:11
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Wawa521

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
9楼2016-08-21 01:39:39
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werq63

金虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by Wawa521 at 2016-08-21 01:39:39
你好，我想问一下怎么用snapgene 看有没有移码突变呢？
...

snapgene左侧竖着的工具栏有一个翻译的工具，你看看读码框是不是和你的设计一样

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10楼2016-08-21 08:11:33
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