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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 用pcr菌p的话在测序会不会发生突变导致结果不太准确
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qwqwqwqwq

新虫 (初入文坛)

[求助] 用pcr菌p的话在测序会不会发生突变导致结果不太准确 已有2人参与

大肠杆菌提取浓度太低 尝试过延长培养时间和增加菌液的量 还是不行 送去测序没有结果 我送去了一个高保真酶菌落pcr的测序结果 不知道这种方法会不会扩增过程中发生碱基突变导致结果不准确？
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1楼 2016-08-18 09:49:13
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
高保真酶应该不容易发生碱基突变。你可以多用些菌液提取质粒浓缩后送质粒测序。
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2楼2016-08-18 13:54:46
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肥猫p

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果是PCR产物直接测序，再烂的酶也不会突变。即使有少量的突变，相对于整体还是极少的，测序不会读出错误结果的。
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3楼2016-08-19 10:21:30
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