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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 免疫实验 » 求助生物素和抗体偶联相关问题。
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合欢小羊

木虫 (小有名气)

[求助] 求助生物素和抗体偶联相关问题。 已有2人参与

如题，最近在做磁珠偶联抗体的实验，这次要用SA磁珠，抗体需要提前生物素化，查了相关资料，基本都是用NHS-Biotin，但我现在没有NHS-Biotin，只有D-Biotin，请问可以用D-Biotin将抗体生物素化吗？小白一个，希望懂的大侠不吝赐教，谢谢！
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付出不一定有收获，但不付出一定没有收获。。
1楼 2016-08-17 10:04:38
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greeneese

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
NHS-生物素是D-生物素的琥珀酰亚胺酯，多出来的NHS基团就是专门为方便和蛋白质中的氨基发生酰胺反应而加上的；因此NHS-生物素才成为一种主要为蛋白质的修饰而推出的试剂。

所以对于你的问题，应该说，不能说绝对不能，但肯定比NHS-生物素要费劲很多。
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合欢小羊
2楼2016-08-18 20:45:59
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paramita09

木虫 (小有名气)

高级经理
买点Biotin-NHS好了，这玩意又不贵。不能用Biotin直接标，也不建议使用EDC/NHS in situ生成NHS酯的方法，抗体会损失很多活性
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合欢小羊
踏入江湖是我命
3楼2016-08-18 21:53:25
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jackmill

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
4楼2016-08-20 20:24:15
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超六的FL

金虫 (小有名气)
购买时注意产品信息，买活性基团磺酸化的（有人称为NHSS-），这样易于溶解，便于偶联

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合欢小羊
5楼2016-08-22 06:16:07
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合欢小羊

木虫 (小有名气)
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引用回帖:
2楼: Originally posted by greeneese at 2016-08-18 20:45:59
NHS-生物素是D-生物素的琥珀酰亚胺酯，多出来的NHS基团就是专门为方便和蛋白质中的氨基发生酰胺反应而加上的；因此NHS-生物素才成为一种主要为蛋白质的修饰而推出的试剂。

所以对于你的问题，应该说，不能说绝对 ...

多谢多谢
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付出不一定有收获，但不付出一定没有收获。。
6楼2016-08-22 09:23:01
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合欢小羊

木虫 (小有名气)
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3楼: Originally posted by paramita09 at 2016-08-18 21:53:25
买点Biotin-NHS好了，这玩意又不贵。不能用Biotin直接标，也不建议使用EDC/NHS in situ生成NHS酯的方法，抗体会损失很多活性

恩，我还是买点NHS-Bio吧，谢啦
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付出不一定有收获，但不付出一定没有收获。。
7楼2016-08-22 09:23:44
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合欢小羊

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jackmill at 2016-08-20 20:24:15
最好还是买活化好的biotin（biotin-NHS），或者你自己用EDC/NHS把biotin的羧基先活化了，然后再和抗体反应。不过建议还是买商品化的，因为商品化的试剂比自己合成的纯度要高，而且一般还会在biotin与NHS间接长臂，减 ...

谢啦
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付出不一定有收获，但不付出一定没有收获。。
8楼2016-08-22 09:24:02
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合欢小羊

木虫 (小有名气)
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引用回帖:
5楼: Originally posted by 超六的FL at 2016-08-22 06:16:07
购买时注意产品信息，买活性基团磺酸化的（有人称为NHSS-），这样易于溶解，便于偶联

好的，多谢
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付出不一定有收获，但不付出一定没有收获。。
9楼2016-08-22 09:24:14
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