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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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合欢小羊

木虫 (小有名气)

[求助] 求助生物素和抗体偶联相关问题。 已有2人参与

如题,最近在做磁珠偶联抗体的实验,这次要用SA磁珠,抗体需要提前生物素化,查了相关资料,基本都是用NHS-Biotin,但我现在没有NHS-Biotin,只有D-Biotin,请问可以用D-Biotin将抗体生物素化吗?小白一个,希望懂的大侠不吝赐教,谢谢!
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greeneese

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
NHS-生物素是D-生物素的琥珀酰亚胺酯,多出来的NHS基团就是专门为方便和蛋白质中的氨基发生酰胺反应而加上的;因此NHS-生物素才成为一种主要为蛋白质的修饰而推出的试剂。

所以对于你的问题,应该说,不能说绝对不能,但肯定比NHS-生物素要费劲很多。

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2楼2016-08-18 20:45:59
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paramita09

木虫 (小有名气)

高级经理

买点Biotin-NHS好了,这玩意又不贵。不能用Biotin直接标,也不建议使用EDC/NHS in situ生成NHS酯的方法,抗体会损失很多活性

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踏入江湖是我命
3楼2016-08-18 21:53:25
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jackmill

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

4楼2016-08-20 20:24:15
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超六的FL

金虫 (小有名气)

购买时注意产品信息,买活性基团磺酸化的(有人称为NHSS-),这样易于溶解,便于偶联

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5楼2016-08-22 06:16:07
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合欢小羊

木虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by greeneese at 2016-08-18 20:45:59
NHS-生物素是D-生物素的琥珀酰亚胺酯,多出来的NHS基团就是专门为方便和蛋白质中的氨基发生酰胺反应而加上的;因此NHS-生物素才成为一种主要为蛋白质的修饰而推出的试剂。

所以对于你的问题,应该说,不能说绝对 ...

多谢多谢
付出不一定有收获,但不付出一定没有收获。。
6楼2016-08-22 09:23:01
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合欢小羊

木虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by paramita09 at 2016-08-18 21:53:25
买点Biotin-NHS好了,这玩意又不贵。不能用Biotin直接标,也不建议使用EDC/NHS in situ生成NHS酯的方法,抗体会损失很多活性

恩,我还是买点NHS-Bio吧,谢啦
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7楼2016-08-22 09:23:44
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合欢小羊

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by jackmill at 2016-08-20 20:24:15
最好还是买活化好的biotin(biotin-NHS),或者你自己用EDC/NHS把biotin的羧基先活化了,然后再和抗体反应。不过建议还是买商品化的,因为商品化的试剂比自己合成的纯度要高,而且一般还会在biotin与NHS间接长臂,减 ...

谢啦
付出不一定有收获,但不付出一定没有收获。。
8楼2016-08-22 09:24:02
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合欢小羊

木虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by 超六的FL at 2016-08-22 06:16:07
购买时注意产品信息,买活性基团磺酸化的(有人称为NHSS-),这样易于溶解,便于偶联

好的,多谢
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9楼2016-08-22 09:24:14
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