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syfaf12345

新虫 (初入文坛)


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关于蛋白结晶脱盐换buffer问题
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第一次做晶体。老板让结晶一个葡萄糖苷水解酶,His-tag,大小55kd…先用镍柱纯化,然后用pd10脱盐,从镍柱洗脱液更换为10mM Tris 20mM 氯化钠buffer。可从pd10脱盐柱接下来的蛋白液浓度大为稀释…从原来的2.7mg/ml直接变为0.4…这是什么情况?是不是buffer的盐浓度有问题?恳请大神解答一下疑惑。十分感谢!

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
G25脱盐,排阻色谱柱,过完柱子样品稀释了不很正常么
7楼2016-08-17 14:14:43
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王艳华0113

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问你的蛋白分子量是55KDa的话,那该选用什么型号的填充料呢,G25对应的分子量是1000-5000.那分子量是55000岂不是无法洗脱下来
8楼2018-07-11 14:17:58
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2016-08-16 23:36   回复  
syfaf12345(金币+1): 谢谢参与
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nfer3楼
2016-08-16 23:36   回复  
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fulaishan6楼
2016-08-16 23:36   回复  
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