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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 双荧光素酶检测实验设计问题
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寒星jy

新虫 (初入文坛)

[求助] 双荧光素酶检测实验设计问题 已有2人参与

第一次做这种实验实验，实验目的是检测不同启动子对同种转录因子活性的影响，现在已经把转录因子序列构建到上pCDNA3.1载体了，启动子也已经构建到了PGL3-basic载体上，导师说接下来要求用双荧光素酶检测。有如下一个疑问：
1.用设计对照组么？如果用怎么设置阴性对照组和阳性对照组？

本人第一次做双萤光素酶检测实验，如果大家有什么好的想法或建议，请教一下，谢谢。
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1楼 2016-08-15 19:21:30
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llsllslls92

金虫 (小有名气)
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-10-25 08:29:14
同问

发自小木虫Android客户端
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3楼2016-10-25 01:21:53
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寂寞之巅

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
寒星jy: 金币+5 2017-03-27 13:37:58
肯定要设对照组的 阴性对照 就用pCDNA3.1 空载 阳性对照 确定你在测定的时候 实验步骤 操作是没问题的 可以使用已经报道的 有确定转录激活作用的 转录因子和启动子 一般这种都有现成的  如果证明你的转录因子有转录活性 可以 做个梯度 转染，就是不同浓度的转录因子DNA转染量
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好好学习，天天向上
4楼2016-10-25 08:30:49
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