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pcr p不出来啊
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遇到一个很令我头疼的问题，不知道有无相同经历的虫友，还请有经验的大侠指教啊！ 问题如下：质粒做模板扩基因的全长 有三对引物：引物A, 只加了一个酶切位点 HindIII+20bp 引物B,NotI+20bp speI+20bp 引物C,kpnI+20bp AvrII+20bp 其中正向引物和反向引物的20bp都是相同的，结果是只有引物B能扩出来，而且扩的很好，用引物A和C都扩不出来（模板相同）。后来我拿引物B扩的pcr产物做模板也扩不出来。退火温度做过梯度，三步法，两步法都试过。都不行。大侠指教啊，急切想解决这个问题.先谢谢大家了 [ Last edited by 350784478 on 2009-11-8 at 15:16 ] |
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