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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 试了多个条件的改变，PCR结果总是出现多条带，求助各位，谢谢。
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云卷云舒六

银虫 (初入文坛)
应该是引物特异性不好，如果实验只要求定性的话只要有目的条带即可，想要做的更好可以求助大神给设计一条引物。

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11楼2016-08-15 08:51:05
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korchagin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以尝试以切胶回收的条带为模板，再次扩增
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12楼2016-08-15 08:52:46
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踏云逐月

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没看看延伸时间合适不？我以前做也出现这种问题，延伸时间短的话可能会这样，后来延伸时间改了以后就好了！
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13楼2016-08-15 09:12:49
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harry007

新虫 (小有名气)
你的引物overlap部分有几个bp？

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14楼2016-08-15 10:32:51
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zhangyunjing

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以采用HotStart DNA Polymerase，该酶的特点就是减少非特异扩增和引物二聚体的生成
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rainwater
15楼2016-08-15 16:07:25
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tangbowen

新虫 (小有名气)
可以增加循环，也可以用高保真酶扩增回收后二次扩增

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16楼2016-08-15 23:51:20
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masterboyama

铁虫 (著名写手)
引物是关键。

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17楼2016-08-16 07:15:52
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sylar1022

铜虫 (初入文坛)
切下条带，回收，做模版p

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18楼2016-08-16 08:26:46
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zhangtao110

银虫 (小有名气)
引物加长，25bp会好很多

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19楼2016-08-16 10:45:10
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cheng910323

木虫 (小有名气)
楼主，你好，一，你的引物特异性不强，导致杂带较多。二，切胶回收效率低，建议pcr

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不语
20楼2016-08-16 11:12:17
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