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云卷云舒六

银虫 (初入文坛)

应该是引物特异性不好,如果实验只要求定性的话只要有目的条带即可,想要做的更好可以求助大神给设计一条引物。

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11楼2016-08-15 08:51:05
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korchagin

木虫 (小有名气)

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感谢参与,应助指数 +1
可以尝试以切胶回收的条带为模板,再次扩增
12楼2016-08-15 08:52:46
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踏云逐月

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没看看延伸时间合适不?我以前做也出现这种问题,延伸时间短的话可能会这样,后来延伸时间改了以后就好了!
13楼2016-08-15 09:12:49
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harry007

新虫 (小有名气)

你的引物overlap部分有几个bp?

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14楼2016-08-15 10:32:51
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zhangyunjing

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以采用HotStart DNA Polymerase,该酶的特点就是减少非特异扩增和引物二聚体的生成
rainwater
15楼2016-08-15 16:07:25
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tangbowen

新虫 (小有名气)

可以增加循环,也可以用高保真酶扩增回收后二次扩增

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16楼2016-08-15 23:51:20
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masterboyama

铁虫 (著名写手)

17楼2016-08-16 07:15:52
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sylar1022

木虫 (正式写手)

切下条带,回收,做模版p

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18楼2016-08-16 08:26:46
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zhangtao110

银虫 (小有名气)

19楼2016-08-16 10:45:10
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cheng910323

木虫 (小有名气)

楼主,你好,一,你的引物特异性不强,导致杂带较多。二,切胶回收效率低,建议pcr

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不语
20楼2016-08-16 11:12:17
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