| 查看: 224 | 回复: 0 | ||
[求助]
SUB Cloning
|
|
在做CPISPR Off-target analysis 时候用到了单克隆，载体是P-blunt载体，添加了3ul PCR产物和0.3ul 的载体，室温10min。感受态细胞冰上化冻后，与之前的混合物混在一起（没有轻弹混匀），在冰上20min,42度下热激30s，再在冰上3Min。加入500ul LB培养基。37度摇床1h。用的是卡钠选择培养基。之后送公司挑单克隆测序。 上述的步骤，除了没混匀就没什么错误了，培养了一晚，什么都没长出来。之前重复过好多次，要么长的量少，要么长不出。 本人是实验小白，请大神指教。 |
回复此楼» 猜你喜欢
面上项目申报
已经有3人回复
-
有时候真觉得大城市人没有县城人甚至个体户幸福
已经有5人回复
-
酰胺脱乙酰基
已经有9人回复
-
CSC & MSCA 博洛尼亚大学能源材料课题组博士/博士后招生｜MSCA经费充足、排名优
已经有5人回复
-
有70后还继续奋斗在职场上的吗？
已经有6人回复
-
博士延得我，科研能力直往上蹿
已经有7人回复
-
退学或坚持读
已经有27人回复
-
面上基金申报没有其他的参与者成吗
已经有5人回复
-
遇见不省心的家人很难过
已经有22人回复