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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 定量PCR
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781055707

木虫 (著名写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by zhangxf2014 at 2016-08-08 12:19:36
引物也重新合成过，但是做出来的还是一样。不会做之前就污染了吧？
...

重新设计呀。
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采菊东篱下，悠然见南山。
11楼2016-08-08 12:33:07
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zhangxf2014

新虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 781055707 at 2016-08-08 12:33:07
重新设计呀。...

重新设计了不同位点的引物，但是效果不是很好。所以用的都是相对好点的引物

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12楼2016-08-08 12:41:07
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star013

新虫 (知名作家)
我们公司可以提供荧光定量技术服务

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13楼2016-08-08 18:25:06
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zhangxf2014

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by vanchy at 2016-08-08 09:07:44
建议吧把NTC的扩增片段连接到T质粒中送测序，看一下到底扩增出来的是什么片段。如果是目的片段，则你的环境或试剂还是有污染。

请问定量PCR的产物可以直接做TA克隆，然后送去测序么？还是需要重新回收条带做克隆？？谢谢
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14楼2016-08-17 21:52:55
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vanchy

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
14楼: Originally posted by zhangxf2014 at 2016-08-17 21:52:55
请问定量PCR的产物可以直接做TA克隆，然后送去测序么？还是需要重新回收条带做克隆？？谢谢...

需要回收纯化的，不然产物不纯测出来的序列不一定是你想要的序列~另外你扩增用的是taq还是pfu？需要确定所用酶能否做TA克隆

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15楼2016-08-18 12:42:37
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zhangxf2014

新虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by vanchy at 2016-08-18 12:42:37
需要回收纯化的，不然产物不纯测出来的序列不一定是你想要的序列~另外你扩增用的是taq还是pfu？需要确定所用酶能否做TA克隆
...

好的，谢谢！我们用的taq酶

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16楼2016-08-18 14:02:19
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