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daweizi

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
17楼: Originally posted by lanmengyixin at 2016-08-08 12:12:08
这个真没有，我们实验室做的是25ul体系的，每个孔加1ul cDNA,1.5ul 引物，10.5ul水，11ul SYBR，然后就上机。退火温度都是系统设置的，也没有改过，整个程序下来时间是1h46min
...

哦，我网上找到了

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21楼2016-08-08 15:01:13
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shangxiangp
22楼2016-08-08 15:06:29
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star013

新虫 (知名作家)
我们公司可以提供定量PCR技术服务

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23楼2016-08-08 15:16:42
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许彦

木虫 (正式写手)
是不是根本就没有扩增

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24楼2016-08-09 11:08:11
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曼陀罗的祈祷

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我是直接设计好几对引物，然后拿去做普通pcr，然后看跟actin引物扩增亮度最接近的，就选了那一对
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想做个有趣的人，却在逗比的道路上越走越远~
25楼2016-08-09 12:59:43
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jie123400

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by lanmengyixin at 2016-08-07 21:01:01
用的是SYBR MIX。引物比对了，没有问题。同样的模板也做其他引物了，溶解曲线都是单峰，所以不知道这是什么原因！难道是本身就不表达这个基因？
...

如果不确定是否表达这个基因就需要重新调研了，既然模板没有问题，建议多设计几对引物再试一下吧。
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26楼2016-08-09 13:35:11
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D东东

银虫 (小有名气)

走进阳光的孩子（被晒黑了）
有可能是DNA没有提取好，体系或者反应条件设置有问题

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ALLISWELL。
27楼2016-08-09 18:25:54
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mlxmiao

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
程序有没有搞对？实验方法步骤哪？

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28楼2016-08-09 18:28:26
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dqtianbin

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
29楼2016-08-11 07:44:39
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Mr55

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
30楼2016-08-11 08:11:26
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