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ELISA
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我们是用此实验研究小分子和肽段竞争结合蛋白的能力,每个孔的量是100ul,实验用的板子也是新买的。实验步骤:1先加入链霉亲和素包被板子,4度过夜,次日早上洗涤三次(每孔加满洗涤液)每次静置3分钟,每次洗完后甩干;2加生物素标记的肽段,孵育2小时,按上述洗涤三次;3加入蛋白(一抗)和我们的化合物,孵育1小时,按上述洗涤3次;4 加二抗,孵育1小时后洗涤3次;5 加TMB显色液,避光静1小时;6加入终止液;7测定吸收值。 之前4月份我们做的结果还有浓度梯度。后来我们通过排除法推断可能是链霉亲和素出了问题,想问下有没有做ELISA实验的,你们的链霉亲和素一直好用吗?是买的哪家公司的链霉亲和素?谢谢 @gyesang |
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