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预实验可以P出目地条带,之后就再P不出来 已有2人参与
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用的LA酶,20ul体系,模版是cDNA 预变性94℃ 2min,变性 94℃ 30S ,72℃延伸2min,退火55、58、61三个梯度。35个循环 这是我第一次PCR预实验的结果,第一个和最后一个之后再没有P出来,不论是20ul还是50ul体系。一直找不到原因。 引物是小导合成的,说是最优化了了。。。。有大神帮我分析下吧, 或者是换体系,还是什么的。。。。 |
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