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O天琊O

银虫 (小有名气)

[求助] 磁珠法核酸提取 已有5人参与

请教各位,在应用磁珠法进行细菌基因组核酸提取时,我能不能先用一定浓度的BSA将磁珠封闭一段时间呀,我感觉磁珠可能对蛋白也有一定的吸附作用,请问这样做可行嘛?
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没有什么不可以
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yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)


【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
O天琊O: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-10-09 08:17:27
肯定是不可以啊。那样核酸也提不出来了,洗脱的时候蛋白浓度肯定高嘛。你可以试试purimagbead.com的磁珠,我们用效果不错。
2楼2016-10-07 23:10:42
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甲子湖学子

铁虫 (小有名气)

肯定会吸附蛋白啊,后面有洗涤剂啊

发自小木虫IOS客户端
3楼2016-10-28 17:22:09
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giant001

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
O天琊O: 金币+2, 有帮助, 只能给你这么多了,因为我直接用PCR Mix洗脱的,需要防止磁珠对Taq酶的吸附 2016-11-03 15:19:13
提取细菌基因组DNA还是比较简单的实验,可以按照如下的操作步骤:
1、区菌液到离心管,离心保留沉淀,加入裂解液,水浴
2、加入结合液、磁珠,混匀
3、磁分离,弃上清,洗涤
4、静置晾干
5、加入洗脱液,洗脱。
只要你的磁珠够稳定,不用做任何处理,直接拿来用就行,洗涤的时候要注意,多洗几遍,这样蛋白、盐等杂质会被洗掉。
再具体点的话,可以参考:http://www.giant-bio.com/ProductShow.asp?id=176
4楼2016-11-03 09:35:17
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jianshuilan

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by giant001 at 2016-11-03 09:35:17
提取细菌基因组DNA还是比较简单的实验,可以按照如下的操作步骤:
1、区菌液到离心管,离心保留沉淀,加入裂解液,水浴
2、加入结合液、磁珠,混匀
3、磁分离,弃上清,洗涤
4、静置晾干
5、加入洗脱液,洗脱。 ...

请教,结合液都有什么成分
5楼2017-04-13 16:18:59
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1974707632

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yubeihong at 2016-10-07 23:10:42
肯定是不可以啊。那样核酸也提不出来了,洗脱的时候蛋白浓度肯定高嘛。你可以试试purimagbead.com的磁珠,我们用效果不错。

我们也用这个,哈哈hand:
6楼2017-06-19 11:26:07
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Explor

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我们直接用BIOG的磁珠法核酸提取试剂盒就行了,不用考虑那么多
个性化基因研究、科研试剂、诊断试剂和实验服务
7楼2020-01-09 10:23:07
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你是路人甲

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

建议不要,磁珠法核酸提取具有传统DNA提取方法无法比拟的优势:能够实现自动化、大批量操作,目前已有96孔的核酸自动提取仪,用一个样品的提取时间即可实现对96个样品的处理,符合生物学高通量的操作要求,使得传染性疾病爆发时能够进行快速及时的应对,这一特点使得传统方法望尘莫及;biodai磁珠法操作简单、用时短,整个提取流程只有四步,大多可以在30分钟内完成;安全无毒,不使用传统方法中的苯、氯仿等有毒试剂,对实验操作人员的伤害减少到最少,完全符合现代环保理念
8楼2020-04-02 13:29:14
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新芝生物

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

从技术原理上来看,移液法和吸附柱式相对磁棒法是存在一定的技术劣势的:
移液法:1、取液的时候会存在液体残留(尤其是血液类的样本)
        2、取液时容易将磁珠吸走
        3、如果存在固体残留,会堵住枪头
吸附柱式:1、当存在固体残留时,会存在堵住滤膜的风险
        2、一旦吸附柱存在残次品,会存在漏液现象
        3、操作时间长
9楼2020-06-08 13:42:44
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