24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 5446  |  回复: 13

皮蛋同学

新虫 (小有名气)

[求助] 量子点与DNA怎么连接?以及怎样表征? 已有1人参与

本人在做羧基修饰量子点和氨基修饰DNA的连接,看了文献有些不一样的方法,现在遇到以下问题,希望大神们指导。实验室没有师兄师姐做过量子点,时间紧迫,如能帮助,万分感激
1. 量子点与DNA连接的方法。要不要用EDC和NHS激活,连接后要不要用乙醇胺封闭没有完全结合的量子点上的羧基?以及他们的用量及反应时间。(我用的1mM的EDC和NHS,激活,10mM的乙醇胺)
2. 连接搅拌多少小时,需要4度吗
3. 如何去除未连接上的DNA。我看文献里有直接离心的,我尝试13300rpm, 30分钟离心,只离心下来很少一部分(实验室4度离心机最高转速13300)。我看还有文献是用超滤离心管的,没用过这个东西,我们实验室能离心超滤管的4度离心机,最高转速只有6000,我离心20分钟后,发现啊滤膜上的液体全部被甩下来,量子点被甩在滤膜上了,弄不下来。据做蛋白的师姐说说正常的应该是滤膜上也有液体的啊。而且滤膜上面的空间这么小,移液枪的枪头都伸不进去,怎么把上层液体弄出来呢。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

a270295049

捐助贵宾 (小有名气)

星烁纳米-量子点


【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
皮蛋同学: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2016-08-02 17:55:18
你好,用EDC活化就行,NHS不要放,可以先投氨基DNA,然后再投EDC,孵育2h以上,最好超滤将多余DNA滤掉,你的超滤膜分子量得选对,如果是CdTe量子点的话一般3KDa或者10Kda就可以,超过的话,量子点会离心下来,如果有技术需要,随时联系我。
2楼2016-08-02 08:40:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

下不少功夫

新虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 脚滑的蛇 at 2016-11-12 13:29:25
请问楼主的实验有进展了没有?我做的方向跟楼主一样,不过我用的是碳量子点,不是半导体量子点,而且EDC和NHS的比例是3:1,活化时间是15min,37℃摇床。主要的是,偶联DNA 的条件不太明确,多余的DNA我也没有去除, ...

我也在用碳量子点与DNA连接 现在还是什么条件都没弄明白 怎么都是连接不上 请帮忙指点一下

发自小木虫IOS客户端
7楼2017-05-16 09:44:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

皮蛋同学

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by a270295049 at 2016-08-02 08:40:53
你好,用EDC活化就行,NHS不要放,可以先投氨基DNA,然后再投EDC,孵育2h以上,最好超滤将多余DNA滤掉,你的超滤膜分子量得选对,如果是CdTe量子点的话一般3KDa或者10Kda就可以,超过的话,量子点会离心下来,如果有 ...

非常感谢,还有一些问题,我看文献里都有说加NHS,据说会增加稳定性?还有我看文献里都是先活化,再加DNA的啊,这个顺序有什么影响吗?
还有,我的量子点就是CdTe,选择的是10k的超滤管,头两次的离心时间久了,剩下的液面低于膜的高度,有一些量子点就粘在在膜上了,这是正常现象吗?是不是只要剩下的液面高于膜的高度,就不会出现这种情况?
3楼2016-08-02 17:59:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

皮蛋同学

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by a270295049 at 2016-08-02 08:40:53
你好,用EDC活化就行,NHS不要放,可以先投氨基DNA,然后再投EDC,孵育2h以上,最好超滤将多余DNA滤掉,你的超滤膜分子量得选对,如果是CdTe量子点的话一般3KDa或者10Kda就可以,超过的话,量子点会离心下来,如果有 ...

还有一个问题,EDC该加多少,文献有用1mM的,有用1mg加入到1mL Tris-Hcl的。但是这两种浓度都不好配制啊,量太小称不出来,如果配制成100X的储存液,看有的文献又说需要新鲜配制,没有新鲜配制会不会有影响?望指导
4楼2016-08-02 18:02:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

脚滑的蛇

铜虫 (初入文坛)

请问楼主的实验有进展了没有?我做的方向跟楼主一样,不过我用的是碳量子点,不是半导体量子点,而且EDC和NHS的比例是3:1,活化时间是15min,37℃摇床。主要的是,偶联DNA 的条件不太明确,多余的DNA我也没有去除,所以测试的荧光不稳定。例如缓冲溶液和温度,用量等等,楼主是否有建议?
5楼2016-11-12 13:29:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

皮蛋同学

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 脚滑的蛇 at 2016-11-12 13:29:25
请问楼主的实验有进展了没有?我做的方向跟楼主一样,不过我用的是碳量子点,不是半导体量子点,而且EDC和NHS的比例是3:1,活化时间是15min,37℃摇床。主要的是,偶联DNA 的条件不太明确,多余的DNA我也没有去除, ...

时间用的半小时,常温,搅拌。多余的dna用超滤管离心

发自小木虫Android客户端
6楼2016-11-13 02:43:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

早日上岸

新虫 (小有名气)

请问有相关文章可以让我参考参考吗?刚开始接触,好像啥也不懂

发自小木虫Android客户端
8楼2020-06-01 15:25:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Sun_1083

新虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by a270295049 at 2016-08-02 08:40:53
你好,用EDC活化就行,NHS不要放,可以先投氨基DNA,然后再投EDC,孵育2h以上,最好超滤将多余DNA滤掉,你的超滤膜分子量得选对,如果是CdTe量子点的话一般3KDa或者10Kda就可以,超过的话,量子点会离心下来,如果有 ...

您好,请问DNA单链上碱基的伯胺会不会也和量子点上的羧基反应?感谢您的帮助!
9楼2020-09-05 19:26:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Sun_1083

新虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 脚滑的蛇 at 2016-11-12 13:29:25
请问楼主的实验有进展了没有?我做的方向跟楼主一样,不过我用的是碳量子点,不是半导体量子点,而且EDC和NHS的比例是3:1,活化时间是15min,37℃摇床。主要的是,偶联DNA 的条件不太明确,多余的DNA我也没有去除, ...

您好,请问DNA单链上碱基的伯胺会不会也和量子点上的羧基反应?感谢您的帮助!
10楼2020-09-05 19:26:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 皮蛋同学 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 071000生物学调剂 +7 拉提桃 2026-04-06 7/350 2026-04-06 18:55 by 52305043001
[考研] 288求调剂 +8 没有答案_ 2026-04-05 8/400 2026-04-06 14:11 by lqwchd
[考研] 一志愿河北工业大学材料工程,初试344求专硕调剂 +6 15933906766 2026-04-05 6/300 2026-04-06 13:21 by 无际的草原
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学085600英一数二337分求调剂 +12 lyz0427 2026-04-03 12/600 2026-04-06 06:37 by houyaoxu
[考研] 一志愿郑州大学085600求调剂 +17 吃的不少 2026-04-05 20/1000 2026-04-06 00:32 by T可可西里T
[考研] 266分,一志愿电气工程,本科材料,求材料专业调剂 +11 哇呼哼呼哼 2026-04-01 12/600 2026-04-04 23:17 by 永字号
[考研] 085600调剂 +4 1amJJ 2026-04-02 4/200 2026-04-04 21:53 by hemengdong
[考研] 331求调剂 +3 niby 2026-04-02 3/150 2026-04-04 19:56 by 蓝云思雨
[考研] 306求调剂 +3 hyb上名工 2026-04-02 3/150 2026-04-04 18:12 by 热情沙漠
[考研] 305求调剂 +3 77Qi 2026-04-03 3/150 2026-04-03 23:01 by qzxyhcsy
[考研] 281求调剂 +10 aaawhy 2026-04-03 10/500 2026-04-03 21:42 by lbsjt
[考研] 315求调剂 +6 顺理成张 2026-04-03 8/400 2026-04-03 14:04 by 百灵童888
[考研] 一志愿北京交通大学材料工程总分358 +4 cs0106 2026-04-03 4/200 2026-04-03 13:41 by 百灵童888
[考研] 求调剂 +3 心想事成可 2026-04-03 3/150 2026-04-03 11:22 by wangjy2002
[考研] 338求调剂,一志愿能源动力,外语是日语203 +5 zzz,,r 2026-04-02 5/250 2026-04-03 09:45 by 蓝云思雨
[考研] 重庆大学材料与化工085600,初试370+,求求调剂建议 +8 shzhou_ 2026-04-01 9/450 2026-04-03 09:31 by 蓝云思雨
[考研] 化学工程专硕324分,一志愿中国矿业大学求调剂 +7 耿耿1314 2026-04-01 7/350 2026-04-02 07:40 by 尚水阁主
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-03-31 11/550 2026-04-01 22:25 by zhouyuwinner
[考研] 08工科275求调剂,可跨考。 +5 AaAa7420 2026-03-31 5/250 2026-04-01 15:21 by 159357hjz
[考研] 080500-315分复试调剂 +9 上岸3821 2026-03-31 9/450 2026-03-31 17:29 by 唐沐儿
信息提示
请填处理意见