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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 关于用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度
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q13df4t

木虫 (著名写手)

[求助] 关于用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度 已有2人参与

请问BCA蛋白定量试剂盒能不能测定含有7个氨基酸的短肽的浓度？
我用BSA稀释成等比例浓度梯度，制作了标准曲线都没什么问题，但是为什么将短肽稀释至等比例浓度后测定实际浓度的时候，数据完全不规律，并且偏小，
是不是因为短肽和蛋白质具有本身的不同（氨基酸和肽键太少），无法与Cu2+络合从而无法将BCA试剂中的Cu2+还原为Cu+导致无法检测？

关于用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度
T[H`IJ]{D4@9{2V7TP~WIDQ.png@飞约疯人院@wizardfan
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一人一事一片天，半俗半雅半疯癫
1楼 2016-07-26 13:31:09
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匿名

用户注销 (著名写手)
感谢参与，应助指数 +1
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2楼2016-07-26 13:50:30
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ysc2014

金虫 (正式写手)
看看thermo的多肽定量试剂盒

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3楼2016-07-26 18:14:52
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q13df4t

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ysc2014 at 2016-07-26 18:14:52
看看thermo的多肽定量试剂盒

我用的就是Thermo的Micro BCA试剂盒，但是发现结果不行。

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一人一事一片天，半俗半雅半疯癫
4楼2016-07-26 19:50:15
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keke226

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-07-26 22:12:20
应该是由于肽键太少的原因。如果你的短肽序列是确定的，建议还是直接计算消光系数，用A280分光光度法测浓度会比较准确。
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读书廿年倦写字，如今翻书不识志，若知眷书悔前程，无如渔樵未识时。三年担柴熟山性，三年苦网谙水汹，前程在心自倦舒，识志何用书中清。
5楼2016-07-26 22:04:33
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ysc2014

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by q13df4t at 2016-07-26 19:50:15
我用的就是Thermo的Micro BCA试剂盒，但是发现结果不行。
...

我们之前用的是thermo的CBQCA Protein Quantitation Kit，货号为C6667，没用bca去定量过多肽

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6楼2016-07-27 12:17:37
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q13df4t

木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by keke226 at 2016-07-26 22:04:33
应该是由于肽键太少的原因。如果你的短肽序列是确定的，建议还是直接计算消光系数，用A280分光光度法测浓度会比较准确。

相同质量不同大小的短肽，氨基酸的数目哪个多？还是一样多？
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7楼2016-07-29 07:42:42
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十四_14

荣誉版主 (正式写手)
好短啊……感觉用BCA的方法误差会很大
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q13df4t
8楼2016-08-03 11:15:49
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q13df4t

木虫 (著名写手)
送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by 十四_14 at 2016-08-03 11:15:49
好短啊……感觉用BCA的方法误差会很大

那用什么方法好？

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9楼2016-08-03 12:15:41
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