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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 琼脂糖凝胶电泳上环状的质粒一定比线性化后的小吗？
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小李纸11

银虫 (正式写手)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳上环状的质粒一定比线性化后的小吗？ 已有3人参与

提取了一个质粒，琼脂糖凝胶电泳检测大概六千多bp,但是双酶切（也只切掉五十几个bp）后再跑电泳却成了三千多bp，想知道这样正常吗？环状的质粒是不是线性化之后一定会变大呢？
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1楼 2016-07-22 14:58:17
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dingqian03

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-07-23 09:03:01
你确定不是把基因切开了吗，不可能切掉一半吧

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2楼2016-07-22 22:54:23
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lxzk

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎发帖交流 2016-07-23 09:03:09
环状质粒在完整的超螺旋状态下比线性的迁移快，但是如果有nick，会比线性迁移慢，慢多少和胶浓度有关。
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3楼2016-07-23 04:24:19
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lxzk

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-07-23 09:03:15
可以两个酶分别单酶切看看。另外你的质粒应该有多大是知道的吧。
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4楼2016-07-23 04:25:39
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pangadmire

铁虫 (小有名气)
应该是这样的，我以前的结果就是这样的

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5楼2016-07-24 00:37:49
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houfuyuan

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
质粒：超螺旋形式跑得最快，其次是完全线性化的质粒，再就是开环形式，其中完全线性化后才是质粒真正的大小
。提取之后质粒一般有两个条带。操作粗鲁的话可能有三条。
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玉无瑕，青春无华。
6楼2016-07-24 19:17:22
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博克多

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by houfuyuan at 2016-07-24 19:17:22
质粒：超螺旋形式跑得最快，其次是完全线性化的质粒，再就是开环形式，其中完全线性化后才是质粒真正的大小
。提取之后质粒一般有两个条带。操作粗鲁的话可能有三条。

我提取的质粒都是一条的，而且做PCR后也是一条的，比我们要的目的质粒的长度小很很多的，请问你知道怎么回事吗？谢谢
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没有最好，只有更好
7楼2016-08-18 10:38:51
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