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欧石楠_erica

新虫 (初入文坛)

[求助] 复方及单味药的含药血清hplc图谱无法区分 已有1人参与

最近在做一个复方的含药血清HPLC指纹图谱,如下图按顺序是复方含药血清、单味一、单味二、单味三的含药血清,四个HPLC图出峰情况非常相似,唯一不同的是峰面积大小。按道理它们是不一样的东西啊,求大神指点为什么会出现这种情况?
PS:关于血清预处理做过以下方法:
1.甲醇沉淀蛋白,涡旋,离心,取上清液50摄氏度水浴蒸干,甲醇复溶,振荡,过0.45微孔滤膜,进样
2.血清:2%高氯酸=2:1沉淀蛋白,离心,取上清液,进样。
    流动相试过甲醇-水(漂移太厉害,弃),乙腈-水,乙腈-0.2%磷酸水,分离度OK,就是一排六张图长得一毛一样啊摔!

复方及单味药的含药血清hplc图谱无法区分
复方.png


复方及单味药的含药血清hplc图谱无法区分-1
单方一.png


复方及单味药的含药血清hplc图谱无法区分-2
单方二.png


复方及单味药的含药血清hplc图谱无法区分-3
单方三.png
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gxzhou

木虫 (正式写手)

5楼2016-07-24 22:16:29
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普思生物

专家顾问 (著名写手)

中药对照品,天然产物分离纯化


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by 欧石楠_erica at 2016-07-21 20:34:22
自己顶起来~

你做了血清空白样品没?排除下那些峰是血清里面的

发自小木虫IOS客户端
3楼2016-07-23 09:10:11
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欧石楠_erica

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 普思生物 at 2016-07-23 09:10:11
你做了血清空白样品没?排除下那些峰是血清里面的
...

有做空白血清,但是空白血清跟含药血清一样,也不太分得开。
4楼2016-07-24 21:46:43
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lh_imm

木虫 (正式写手)

空白血清,复方+空白血清,单味药+空白血清,复方(流动相作溶剂),单位药(流动相作溶剂),都做一遍再比较看看,有条件做质谱,没条件用pda扫一下几个峰的紫外吸收,看看一样不,可能的话把主要峰的标准品买来对照。

发自小木虫Android客户端
6楼2016-07-24 23:06:09
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