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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 复方及单味药的含药血清hplc图谱无法区分
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欧石楠_erica

新虫 (初入文坛)

[求助] 复方及单味药的含药血清hplc图谱无法区分 已有1人参与

最近在做一个复方的含药血清HPLC指纹图谱，如下图按顺序是复方含药血清、单味一、单味二、单味三的含药血清，四个HPLC图出峰情况非常相似，唯一不同的是峰面积大小。按道理它们是不一样的东西啊，求大神指点为什么会出现这种情况？
PS：关于血清预处理做过以下方法：
1.甲醇沉淀蛋白，涡旋，离心，取上清液50摄氏度水浴蒸干，甲醇复溶，振荡，过0.45微孔滤膜，进样
2.血清：2%高氯酸=2:1沉淀蛋白，离心，取上清液，进样。
    流动相试过甲醇-水（漂移太厉害，弃），乙腈-水，乙腈-0.2%磷酸水，分离度OK，就是一排六张图长得一毛一样啊摔！

复方及单味药的含药血清hplc图谱无法区分
复方.png


复方及单味药的含药血清hplc图谱无法区分-1
单方一.png


复方及单味药的含药血清hplc图谱无法区分-2
单方二.png


复方及单味药的含药血清hplc图谱无法区分-3
单方三.png
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1楼 2016-07-21 20:33:13
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欧石楠_erica

新虫 (初入文坛)
自己顶起来~
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2楼2016-07-21 20:34:22
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普思生物

专家顾问 (著名写手)

中药对照品，天然产物分离纯化

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by 欧石楠_erica at 2016-07-21 20:34:22
自己顶起来~

你做了血清空白样品没？排除下那些峰是血清里面的

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3楼2016-07-23 09:10:11
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欧石楠_erica

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 普思生物 at 2016-07-23 09:10:11
你做了血清空白样品没？排除下那些峰是血清里面的
...

有做空白血清，但是空白血清跟含药血清一样，也不太分得开。
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4楼2016-07-24 21:46:43
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gxzhou

木虫 (正式写手)
空白都没得，怎么解释啊

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5楼2016-07-24 22:16:29
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lh_imm

木虫 (正式写手)
空白血清，复方+空白血清，单味药+空白血清，复方（流动相作溶剂），单位药（流动相作溶剂），都做一遍再比较看看，有条件做质谱，没条件用pda扫一下几个峰的紫外吸收，看看一样不，可能的话把主要峰的标准品买来对照。

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6楼2016-07-24 23:06:09
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欧石楠_erica

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by lh_imm at 2016-07-24 23:06:09
空白血清，复方+空白血清，单味药+空白血清，复方（流动相作溶剂），单位药（流动相作溶剂），都做一遍再比较看看，有条件做质谱，没条件用pda扫一下几个峰的紫外吸收，看看一样不，可能的话把主要峰的标准品买来对 ...

空白、复方、单方都做过，液质也做过。做液质能看到对照品峰，后来改了液相。空白+复方，空白+单味倒是没做，下次试一下。哎哟，回帖肿么发图啊，想把空白和复方液相图的给您看一下
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7楼2016-07-26 21:19:26
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欧石楠_erica

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by lh_imm at 2016-07-24 23:06:09
空白血清，复方+空白血清，单味药+空白血清，复方（流动相作溶剂），单位药（流动相作溶剂），都做一遍再比较看看，有条件做质谱，没条件用pda扫一下几个峰的紫外吸收，看看一样不，可能的话把主要峰的标准品买来对 ...

恩恩，看到了，可以高级回复~
复方及单味药的含药血清hplc图谱无法区分-4
硫酸铵-含药.png


复方及单味药的含药血清hplc图谱无法区分-5
硫酸铵-空白.png


复方及单味药的含药血清hplc图谱无法区分-6
C18-含药血清.png


复方及单味药的含药血清hplc图谱无法区分-7
C18-空白.png
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8楼2016-07-26 21:24:44
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欧石楠_erica

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 欧石楠_erica at 2016-07-26 21:24:44
恩恩，看到了，可以高级回复~

硫酸铵-含药.png

硫酸铵-空白.png

C18-含药血清.png

C18-空白.png
...

这次用了C18小柱和硫酸铵处理血清，结果空白血清和含药血清简直就是“大家来找茬”……
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9楼2016-07-26 21:27:29
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辉未央

铜虫 (初入文坛)
药物和血清蛋白有没有结合可能

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10楼2016-07-26 22:27:34
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